久久久久久久国产视频I日韩三级久久I婷婷色综合I黄色福利在线I欧美精品成人在线I久久人视频I亚洲国产vI伊人久久在线I69影院一福利I色欲天天综合网一区二区I作爱网站I国产精品ThePorn88I日韩拍拍I91aiseI高清免费无码不卡I男人激情天堂avI91国偷自产一区二区三区观看I欧美色图24pI9|在线视频HDI粗暴肉进入120秒免费

新聞中心

News Center

當前位置:首頁新聞中心心臟組織消化手冊

心臟組織消化手冊

更新時間:2016-02-16點擊次數:2591

世界*實驗材料供應商 Worthington Biochemical 正式授權上海起發為其中國代理, Worthington Biochemical 在一直是行業的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產品和服務,上海起發一直秉承為中國科研客戶帶來的產品,的服務,簽約 Worthington Biochemical 就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產品和服務,您的滿意將是我們zui大的收獲

 Worthington Biochemical 中國代理, Worthington Biochemical 上海代理, Worthington Biochemical 北京代理,Worthington Biochemical 廣東代理, Worthington Biochemical 江蘇代理Worthington Biochemical 湖北代理,Worthington Biochemical 天津,Worthington Biochemical 黑龍江代理,Worthington Biochemical 內蒙古代理,Worthington Biochemical 吉林代理,Worthington Biochemical 福建代理, Worthington Biochemical 江蘇代理, Worthington Biochemical 浙江代理,Worthington Biochemical 四川代理,

 

Worthington組織消化指南

引言

組織消化酶主要用于組織培養和細胞生物學研究的原代細胞的分離和收集。盡管這些消化酶已經普遍應用多年,但是對其組織消化和細胞收集的作用機制卻沒有全面的理解。  由此導致的結果便是選擇一種消化方法大多是隨機選擇或基于過去的經驗,而不是在*理解消化原理的基礎上選擇的消化方案,以及如何根據具體實驗目的修正消化方案以獲得更好的實驗結果。

細胞分離程序的目的是zui大程度的獲得功能活性的單個細胞,而影響結果的原因有很多,包括(不限于)以下:

1、組織類型

2、物種來源

3、動物年齡

4、遺傳改造情況(如knockouts

5、所用的消化培養液

6、所用的酶

7、消化酶中的雜質

8、所用消化酶的工作濃度

9、溫度

10孵育時間

通常前四個原因沒辦法選擇,而剩下的原因一般由經驗決定以獲取zui適實驗結果。

通過查閱文獻來選擇*組織消化酶和zui適消化條件的研究人員通常被互相矛盾的實驗數據搞得一頭霧水。這些巨大差異來源于組織胞外基質的復雜而動態的特性,以及過去常用的粗制、未提純的組織分離酶。另外,組織胞外基質由各種蛋白、糖蛋白、脂類和糖脂組成,這些成分的組成比例在不同物種、不同組織、甚至不同發育(年齡)之間存在明顯的差異,這些因素都極大的影響了消化方案的制定。目前通常使用的粗制酶,如鏈霉蛋白酶、NF1:250、以及含有幾種其他不同濃度蛋白酶的膠原酶、以及各種多糖酶、核酶和脂酶。

本指南總結了目前常用組織消化酶的zui適消化和細胞收集知識和方法,描述了標準的實驗步驟, 便于制定一個*的細胞分離方案,同時列舉了一些相關的參考文獻。

下表列出多種組織的適宜消化酶(含參考文獻,以組織類型和物種分類,詳見鏈接)

脂肪組織

腎上腺組織

骨組織

腦組織

軟骨組織

結腸組織

內皮組織

上皮組織

心臟

淋巴結

乳腺

其它組織

其他組織

肌組織

神經組織

胰腺

腮腺

垂體

前列腺

生殖

動物鱗片

皮膚

脾臟

干細胞

胸腺

甲狀腺/甲狀旁腺

扁桃體

腫瘤

 

 

 

注:使用Worthington公司消化酶的文獻不限于上表鏈接中所列,一般而言,Worthington公司的組織消化酶可用于大多組織類型的消化。

 

心臟組織消化手冊

 

物種詳細來源細胞名稱消化用酶培養基參考文獻
牛 HeartTrypsin: 0.06%25mM HEPES buffered Locke's solution, CMFTrifaro, J., Tang, R., and Novas, M.: Monolayer Co-Culture of Rat Heart Cells and B綿羊 Adrenal Chromaffin Paraneurons, In Vitro Cell Dev Biol 26, 335, 1990
(包括大鼠)Adrenal chromaffin 
 Paraneurons
CardiomyocytesCollagenase Type 2: 150 u/mlTyrode's solutionZhang,D., Wu, C., Qi, X., Meijering, R., Hoogstra-Berends, F., Tadevosyan, A., Cubukcuoglu, et al: Activation of Histone Deacetylase-6 Induces Contractile Dysfunction Through Derailment of alpha-tubulin Proteostasis in Experimental and Human Atrial Fibrillation., Circulation 129, 346-58, 2014
犬, adultAtrial and Ventricular MyocytesCollagenase Type 2: 0.065%See referenceBonilla, I., Sridhar, A., Nishijima, Y., Gyorke, S., Cardounel, A. and Carnes, C.: Differential Effects of the Peroxynitrite Donor, SIN-1, on Atrial and Ventricular Myocyte Electrophysiology., J Cardiovasc Pharmacol 61, 401-7, 2013
CardiomyocytesCollagenase Type 2: 300 u/mlTyrode's solutionXi, Y., Wu, G., Ai, T., Cheng, N., Kalisnik, J., Sun, J., Abbasi, S., Yang, D., Fan, C., Yuan, X., Wang, S. et al: Ionic Mechanisms Underlying the Effects of Vasoactive Intestinal Polypeptide on Canine Atrial Myocardium., Circ Arrhythm Electrophysiol 6, 976-83, 2013
Protease: 0.03%
Atrial MyocytesCollagenase Type 2: 0.03%Tyrode's solutionGan, T., Qiao, W., Xu, G., Zhou, X., Tang, B., Song, J., Li, Y., Zhang, J., Li, F., Mao, T. and Jiang, T.: Aging-Associated Changes in L-type Calcium Channels in the Left Atria of Dogs., Exp Ther Med 6, 919-924, 2013
CardiomyocytesCollagenase Type 2: 60 u/mlSee referenceHarleton, E., Besana, A., Comas, G., Danilo, P., Rosen, T., Argenziano, M., Rosen, M., Robinson, R. and Feinmark, S.: Ability to Induce Atrial Fibrillation in the Peri-Operative Period is Associated with Phosphorylation-Dependent Inhibition of TWIK Protein-Related Acid-Sensitive Potassium Channel 1 (TASK-1)., J Biol Chem 288, 2829-38, 2013
Protease XIV: 0.5 u/ml
Atrial and Ventricular MyocytesCollagenase Type 2: 0.05-0.08%See referenceZhang, H., Silva, J., Lin, Y., Verbsky, J., Lee, U., Kanter, E., Yamada, K., Schuessler, R. and Nichols, C.: Heterogeneity and Function of K(ATP) Channels in Canine Hearts., Heart Rhythm 10, 1576-83, 2013
犬, adultCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%HEPESCalloe, K., Nof, E., Jespersen, T., Di Diego, J., Chlus, N., Olesen, S.? Antzelevitch, C. and Cordeiro, J.: Comparison of the Effects of a Transient Outward Potassium Channel Activator on Currents Recorded from Atrial and Ventricular Cardiomyocytes., J Cardiovasc Electrophysiol 22, 1057-66, 2011
Protease Type XIV: 0.01%
犬, 20-25 kgCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%Tyrode's solutionBurashnikov, A., Zygmunt, A., Di Diego, J., Linhardt, G., Carlsson, L. and Antzelevitch, C.: AZD1305 Exerts Atrial Predominant Electrophysiological Actions and is Effective in Suppressing Atrial Fibrillation and Preventing its Reinduction in the Dog., J Cardiovasc Pharmacol 56, 80-90, 2010
犬, adultCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%M199Gavi, S., Yin, D., Shumay, E., Wang, H. and Malbon, C.: Insulin-Like Growth Factor-I Provokes Functional Antagonism and Internalization of Beta1-Adrenergic Receptors., Endocrinology 148, 2653-62, 2007
Protease: 0.008%
Atrial and Ventricular myocytesCollagenase Type 2: 0.065%Tyrode's solutionSchotten, U., de Haan, S., Verheule, S., Harks, E., Frechen, D., Bodewig, E., Greiser, M., Ram, R., Maessen, J., Kelm, M., Allessie, M. and Van Wagoner, D.: Blockade of Atrial-Specific K+-currents Increases Atrial but not Ventricular Contractility by Enhancing Reverse Mode Na+/Ca2+-Exchange.,Cardiovasc Res 73, 37-47, 2007
Atrial myocytesCollagenase Type 2: 0.013%HEPESBaba, S., Dun, W., Hirose, M. and Boyden, P.: Sodium Current Function in Adult and Aged Canine Atrial Cells., Am J Physiol Heart Circ Physiol 291, H756-61, 2006
犬, 20-30 kgCardiomyocytesCollagenase Type 2: 110 u/mlTyrode's solutionSun, H., Chartier, D., Leblanc, N. and Nat, S.: Intracellular Calcium Changes and Tachycardia-Induced Contractile Dysfunction in Canine Atrial Myocytes., Cardiovasc Res 49, 751-61, 2001
Ventricular and Atrial MyocytesCollagenase Type 4: 0.04%HEPES/Tyrode'sGintant, G.: Two Components of Delayed Rectifier Current in Canine Atrium and Ventricle. Does IKs Play a Role in the Reverse Rate Dependence of Class III Agents?, Circ Res 78, 26-37, 1996
Collagenase Type 2: 125 u/ml
Dog, mongrel, adultMyocytesHyaluronidase: 0.1%Joklik's MEMSpanier, A. and Weglicki, W.: Ca2+-Tolerant Adult Canine Myocytes: Preparation and Response to Anoxia/Acidosis, Am J Physiol 243, H448, 1982
雞, embryonicCardiomyocytesTrypsin: 0.13%HBSSBlech-Hermoni, Y. and Ladd, A.: Identification of Transcripts Regulated by CUG-BP, Elav-like Family Member 1 (CELF1) in Primary Embryonic Cardiomyocytes by RNA-seq., Genom Data 6, 74-76, 2015
Collagenase Type 2: 0.13%
Deoxyribonuclease I: 0.033%
雞 embryos, 9-11 day incubatedCardiomyocytesTrypsin: 0.25%PBSEschenhagen, T., Fink, C., Remmers, U., Scholz, H., Wattchow, J., Weil, J., et al.: Three-Dimensional Reconstitution of Embryonic Cardiomyocytes in a Collagen Matrix: A New Heart Muscle Model System, FASEB J 11, 683, 1997
小雞, embryos, 10-11 dayCardiomyocytesTrypsin: 0.17%HBSS, CMFWang, S., Greaser, M.L., Schultz, E., Bulinski, J.C., Lin, J.J., and Lessard, J.L.: Studies on Cardiac Myofibrillogenesis With Antibodies to Titin, Actin, Tropomyosin, and Myosin, J Cell Biol 107, 1075, 1988
小雞, 10 dayVentricularTrypsin: 0.025%HBSS, CMFKim, D., Okada, A., and Smith, T.W.: Control of Cytosolic Calcium Activity During Low Sodium Exposure in Cultured Chick Heart Cells, Circ Res 61, 29, 1987
小雞, embryo, 11 dayCardiomyocytesTrypsin: 0.05%HBSS, CMFJacob, R., Lieberman, M., Murphy, E., and Piwnica-Worms, D.: Effect of Sodium-Potassium Pump Inhibition and Low Sodium on Membrane Potential in Cultured Embryonic Chick Heart Cells, J Physiol 387, 549, 1987
小雞, embryonic, 11-12-day-oldMyocytesTrypsin: 0.025%CMF solutionMurphy, E., Aiton, J., Russell, C., and Lieberman, M.: Calcium Elevation in Cultured Heart Cells: Its Role in Cell Injury, Am J Physiol Cell Physiol 245 (14), C316, 1983
小雞, 8 day embryo MyocytesTrypsin NF 1:250: 0.25%Rinaldini's buffer solution, CFGross, W., Schopf-Ebner, E., and Bucher, O.: Technique for the Preparation of Homogeneous Cultures of Isolated Heart Muscle Cells, Exp Cell Res 53, 1, 1968
(also rat, neonate and mouse)
Hen, White LeghornHeartTrypsin: 0.025%Medium 199Dehann, R.: Regulation of Spontaneous Activity and Growth of Embryonic Chick Heart Cells in Tissue Culture, Dev Biol 16, 216, 1967
小雞embryos, 5 dayHeartTrypsin: 3.0%Tyrode's solution, CMFSteinberg, M.: "ECM": Its Nature, Origin, And Function in Cell Aggregation, Exp Cell Res 30, 257, 1963
Liver
貓科動物貓, mongrel, adult, 1.8-2.8 KgMyocytesCollagenase Type 2: 0.12%Kreb's Henseleit, CFSilver, L., Hemwall, E., Marino, T., and Houser, S.: Isolation and Morphology of Calcium-Tolerant Feline Ventricular Myocytes, Am J Physiol 245, H891, 1983
Ventricular
魚, 斑馬魚CardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.5%MEMSander, V., Sune, G., Jopling, C., Morera, C. and Belmonte J.: Isolation and In Vitro Culture of Primary Cardiomyocytes from Adult Zebrafish Hearts., Nat Protoc 8, 800-9, 2013
Collagenase Type 4: 0.5%
青蛙青蛙 (Rana esculenta)MyocytesTrypsin: 0.04%CF RingerArrio-Dupont, M., and de Nay, D.: High Yield Preparation of Calcium-Tolerant Myocytes From Frog Ventricles, Biol Cell 54, 164, 1985
豚鼠Guinea pig, adultCardiomyocytesCollagenase Type 2: 100 u/mlM-199Zorn-Pauly K, Schaffer P, Pelzmann B, Bernhart E, Lang P, and Koidl B: L-type and T-type Ca2+ current in cultured ventricular guinea pig myocytes,Physiol Res 53(4), 369, 2004
豚鼠豚鼠CardiomyocytesCollagenase Type 2: 100-200 u/mlSee referenceDhamoon, A, Pandit, S., Sarmast, F., Parisian, K., Guha, P., Li, Y., Bagwe, S., Taffet, S. and Anumonwo, J.: Unique Kir2.x Properties Determine Regional and Species Differences in the Cardiac Inward Rectifier K+ Current.,Circ Res 94, 1332-9, 2004
豚鼠Guinea pig, female, 300-350gCoronary endothelialCollagenase Type 2: 0.1%see referenceBuxton I L, Kaiser R A, Oxhorn B C, Cheek D J: Evidence supporting the Nucleotide Axis Hypothesis: ATP release and metabolism by coronary endothelium, Am J Physiol Heart Circ Physiol 281, H1657-66, 2001
豚鼠Guinea pig, 250-450 gEndothelialCollagenase Type 2: 0.15%Perfusing solutionPreisig-Muller, R., Mederos Y Schnitzler, M., Derst, C., and Daut J.:Separation of Cardiomyocytes and Coronary Endothelial Cells for Cell-Specific RT-PCR, Am J Physiol 277, H413, 1999
(see reference)
豚鼠豚鼠, male, 450-600 gMyocytesHyaluronidase: 0.02%Krebs Henseleit bicarbonate bufferStemmer, P., Akera,T., Brody, T., Rardon, D., and Watanabe, A.: Isolation and Enrichment of Ca2+-Tolerant Myocytes for Biochemical Experiments from Guinea-Pig Heart, Life Sci 44, 1231, 1989
豚鼠豚鼠CardiomyocytesCollagenase: 0.04%Tyrode solution, CFIshihara, K., Mitsuiye, T., Noma, A., and Takano, M.: The Mg2+ Block and Intrinsic Gating Underlying Inward Rectification of the K+ Current in Guinea-Pig Cardiac Myocytes, J Physiol 419, 297, 1989
豚鼠豚鼠MyocytesHyaluronidase: 0.10%Bicarbonate buffer, CFBridge, J., Spitzer, K., and Ershler, P.: Relaxation of Isolated Ventricular Cardiomyocytes by a Voltage-Dependent, Science 241, 823, 1988
人類人類CardiacCollagenase: 0.045%DPBSHolt-Casper, D., Theisen, J., Moreno, A., Warren, M., Silva, F., Grainger, D., Bull, D. and Pa, A.: Novel Xeno-free Human Heart Matrix-Derived Three-Dimensional Scaffolds., J Transl Med 13, 194, 2015
Pancreatin: 0.1%
人類人類Cardiac stemCollagenase Type 2: 0.25%Joklik modified Eagle抯Avolio, E., Gianfranceschi, G., Cesselli, D., Caragnano, A., Athanasakis, E., Katare, R., Meloni, M., Palma, A., Barchiesi, A., Vascotto, C., Toffoletto, B., Mazzega, E., Finato, N., Aresu, G. and Livi, U.: Ex vivo Molecular Rejuvenation Improves the Therapeutic Activity of Senescent Human Cardiac Stem Cells in a Mouse Model of Myocardial Infarction., Stem Cells 32, 2373, 2014
人類人類Atrial myocytesCollagenase Type 1: 286 u/mlsee referencesVoigt, N., Zhou, X. and Dobrev, D.: Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents., J Vis Exp , e50235, 2013
Protease: 5 u/ml
人類人類MyofibersCollagenase Type 1: 0.3%see referenceAnderson, E., Rodriguez, E., Anderson, C., Thayne, K., Chitwood, W. and Kypson, A.: Increased Propensity for Cell Death in Diabetic Human Heart is Mediated by Mitochondrial-Dependent Pathways., Am J Physiol Heart Circ Physiol 300, H118, 2011
人類人類Atrial cardiomyocytesCollagenase Type 1: 286 u/mlsee referenceVoigt, N., Makary, S., Nat, S. and Dobrev, D.: Voltage-Clamp-Based Methods for the Detection of Constitutively Active Acetylcholine-Gated I(K,ACh) Channels in the Diseased Heart., Methods Enzymol 484, 653, 2010
Protease: 5 u/ml
人類人類Coronary artery smooth muscleCollagenase Type 2: 0.1%DMEMJensen, B., Swigart, P., Laden, M., DeMarco, T., Hoopes, C. and Simpson, P.: The Alpha-1D Is the Predominant Alpha-1-Adrenergic Receptor Subtype in Human Epicardial Coronary Arteries., J Am Coll Cardiol 54, 1137, 2009
Elastase: 0.05%
人類人類Smooth muscle aorticCollagenase Type 1: 0.2%DMEMMathew, S., Tustison, K., Sugatani, T., Chaudhary, L., Rifas, L. and Hruska, K.: The Mechanism of Phosphorus as a Cardiovascular Risk Factor in CKD., J Am Soc Nephrol 19, 1092, 2008
Collagenase Type 2: 0.1%
Elastase: 0.025%
人類人類 (n=16, age: 60 &plusmin;3 years)MyocardialHyaluronidase: 0.05%Medium 199Mukerjee, R., Multani, M., Sample, J., Dowdy, K., Zellner, J., Hoover, D., and Spinale, F.: Effects of adrenomedullin on human myocyte contractile function and beta-adrenergic response, J Cardiovasc Pharmacol 7 (4), 235, 2002
人類人類CardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%HEPES solutionTodor Anastassia, Sharov Victor G, Tanhehco Elaine J, Silverman Norman, Bernabei Alvise, Sabbah Hani N: Hypoxia-induced cleavage of caspase-3 and DFF45/ICAD in human failed cardiomyocytes, Am J Physiol Heart Circ Physiol 283, H990-5, 2002
Collagenase Type 1: 0.025%
Protease XIV: 0.013%
人類人類HeartCollagenase Type 2: 200 u/mlTyrode's solutionHoppe, U., Jansen, E., Sudkamp, M., and Beukelmann, D.:Hyperpolarization-Activated Inward Current in Ventricular Myocytes From Normal and Failing Human Hearts, Circulation 97, 55, 1998
Myocytes
人類人類Atrial myocytesCollagenase Type 2: 0.1%see referenceVan Wagoner, D., Pond, A., McCarthy, P., Trimmer, J. and Nerbonne, J.:Outward K+ Current Densities and Kv1.5 Expression are Reduced in Chronic Human Atrial Fibrillation., Circ Res 80, 772-81, 1997
Protease Type XIV: 0.04%
人類人類, fetal, 14.5 week gestationMyocytesHyaluronidase: 0.1%HBSS with CalciumGoldman, B., and Wurzel, J.: Effects of Subc*tion and Culture Medium on Differentiation of Human Fetal Cardiac Myocytes, In Vitro Cell Dev Biol 28, 109, 1992
人類人類, both sexes, 18-81 yearsMyocardialCollagenase: 0.14%HBSS, CMFSmith, D., Glover, J., Townsend, L., and Maupin, E.: A Method for the Harvest, Culture, and Characterization of Human Adult Atrial Myocardial Cells: Correlation with Age of Donor, In Vitro Cell Dev Biol 27, 914, 1991
Atrial
人類人類, adultMyocytesTrypsin: 0.25%Joklik's MEMBugaisky, L.B.: Biology of Isolated Adult Cardiac Myocytes,Isolation and Culture of Human Adult Cardiac Myocytes,(Clark,Decker,Borg,eds), Elsevier Science Publishing Co., Inc., , 1988
人類人類Thoracic aortaCollagenase: 0.2%Phosphate buffer w/NaClHassler, O., Wiren, M., and Herbertsson, S.: The Elastic Coat of the Arterial Wall Studied with the Aid of Collagenase, Acta Pathol Microbiol Scand 57, 15, 1963
無脊椎動物E. cirhosa章魚, 260-352 克Systemic heart cardiomyocytesCollagenase: 0.025%see referenceAltimiras J., Hove-Madsen L., and Gesser H.: Ca(2+) Uptake in the Sarcoplasmic Reticulum from the Systemic Heart of Octopod Cephalopods, J Exp Biol 202, 2531, 1999
Trypsin: 0.02%
小鼠小鼠, 15-30 gmVentricular myocytesCollagenase Type 2: 0.12%see referenceHenn, M., Janjua, M., Kanter, E., Makepeace, C., Schuessler, R., Nichols, C. and Lawton, J.: Adenosine Triphosphate-Sensitive Potassium Channel Kir Subunits Implicated in Cardioprotection by Diazoxide., J Am Heart Assoc 4, , 2015
小鼠小鼠, 3-4 weekCardiac progenitorCollagenase Type 1: 0.1%DMEMWang, H., Chen, H., Feng, B., Wang, X., He, X., Hu, R., Yin, M., Wang, W., Fu, W. and Xu, Z.: Isolation and Characterization of a Sca-1+/CD31- Progenitor Cell Lineage Derived From Mouse Heart Tissue., BMC Biotech4, 75, 2014
小鼠小鼠, adultCardiac ProgenitorCollagenase Type 2: 600 u/mlMEMSantos Nascimento, D, Mosqueira, D, Sousa, L, Teixeira, M, Filipe, M, Resende, T, Araujo, A, Valente, M, Almeida, J, Martins, J, Santos, J, Barcia, R, Cruz, P, Cruz, H and Pinto-d-O, P: Human Umbilical Cord Tissue-Derived Mesenchymal Stromal Cells Attenuate Remodeling after Myocardial Infarction by Proangiogenic, Antiapoptotic, and Endogenous Cell-Activation Mechanisms., Stem Cell Res Ther 5, 5, 2014
Deoxyribonuclease I: 60 u/ml
小鼠小鼠Cardiac progenitorCollagenase Type 2: 0.1%HBSSZafiriou, M., Noack, C., Unsold, B., Didie, M., Pavlova, E., Fischer, H., Reichardt, H., Bergmann, M., El-Armouche, A., Zimmermann, W., Zelarayan, L.: Erythropoietin Responsive Cardiomyogenic Cells Contribute to Heart Repair Post Myocardial Infarction., Stem Cells 32, 2480, 2014
Neutral Protease: 2.4 u/ml
小鼠小鼠, adultCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.08%see referenceKohncke, C. Lisewski, U., Schleussner, L., Gaertner, C., Reichert, S. and Roepke, T.: Isolation and Kv Channel Recordings in Murine Atrial and Ventricular Cardiomyocytes., J Vis Exp 73, e50145, 2013
小鼠小鼠CardiomyocytesCollagenase Type 2: 150 u/mlMEMHennessey, J., Wei, E. and Pitt, G.: Fibroblast Growth Factor Homologous Factors Modulate Cardiac Calcium Channels., Circ Res 113, 381-8, 2013
小鼠小鼠CardiomyocytesCollagenase Type 2: 360 u/mlL-15Touchberry, C., Green, T., Tchikrizov, V., Mannix, J., Mao, T., Carney, B., Girgis, M., Vincent, R., Wetmore, L., Dawn, B., Bonewald, L., Stubbs, J. and Wacker, M.: FGF23 is a Novel Regulator of Intracellular Calcium and Cardiac Contractility in Addition to Cardiac Hypertrophy., Am J Physiol Endocrinol Metab 304, E863, 2013
Papain: 0.4 u/ml
Deoxyribonuclease I: 40 u/ml
小鼠小鼠, 2-6 monthSinoatrial nodeCollagenase Type 2: 229 u/mlTyrode's solutionChris, C., Cardona, N., Mesirca, P., Herrmann, S., Hofmann, F., Striessnig, J., Ludwig, A., Mangoni, M. and Lee, A.: Distinct Localization and Modulation of Cav1.2 and Cav1.3 L-type Ca2+ Channels in Mouse Sinoatrial Node., J Physiol 590, 6327, 2012
Elastase: 1.9 u/ml
Protease Type XIV: 0.9 u/ml
小鼠小鼠, male, 8-25 weekCardiomyocytesCollagenase Type 2: 59 u/mlMEMCarley, A. and Kleinfeld, A.: Fatty Acid (FFA) Transport in Cardiomyocytes Revealed by Imaging Unbound FFA is Mediated by an FFA Pump Modulated by the CD36 Protein., J Biol Chem 286, 4589-97, 2011
小鼠小鼠Aortic adventitial leukocytesCollagenase Type 2: 300 u/mlPBSButcher, M., Herre, M., Ley, K. and Galkina, E.: Flow Cytometry Analysis of Immune Cells Within Murine Aortas., J Vis Exp 53, e2828, 2011
Elastase: 5.6 u/ml
小鼠小鼠, adultCardiomyocytesCollagenase Type 1: 0.1-0.4%see referenceFlynn, J., Santana, L. and Melov, S.: Single Cell Transcriptional Profiling of Adult Mouse Cardiomyocytes., J Vis Exp 58, e3302, 2011
Protease Type XIV: 0.004-.02%
小鼠小鼠, male, 6 weekCoronary endothelial cellsCollagenase Type 2: 0.1%M199Makino, A., Suarez, J., Wang, H., Belke, D., Scott, B. and Dillmann, W.:Thyroid Hormone Receptor-beta is Associated With Coronary Angiogenesis During Pathological Cardiac Hypertrophy., Endocrinology 150, 2008, 2009
Neutral Protease: 0.6 u/ml
小鼠小鼠, adultVentricular myoctesCollagenase: 0.1%M199Zhang, Y, Kanter, E., Laing, J., Aprhys, C., Johns, D., Kardami, E. and Yamada, K.: Connexin43 Expression Levels Influence Intercellular Coupling and Cell Proliferation of Native Murine Cardiac Fibroblasts., Cell Commun Adhes 15, 289, 2008
小鼠小鼠, adult, 9-13 weekCardiomyocytesCollagenase Type 2: 620 u/mlMyocyte buffer see referenceKabaeva, Z., Zhao, M. and Michele, D.: Blebbistatin Extends Culture Life of Adult Mouse Cardiac Myocytes and Allows Efficient and Stable Transgene Expression., Am J Physiol Heart Circ Physiol 294, H1667-74, 2008
Protease XIV: 0.104 u/ml
Deoxyribonuclease I: 0.0015%
小鼠小鼠, adultCardiomyocytesCollagenase: see referenceHBSSO'Connell Timothy D, Rodrigo Manoj C, Simpson Paul C: Isolation and culture of adult mouse cardiac myocytes, Methods Mol Biol 357, 271-96, 2007
小鼠小鼠Smooth muscle cellsCollagenase Type 2: 300 u/mlF10 HamVerheye, S., Martinet, W., Kockx, M., Knaapen, M., Salu, K., Timmermans, J., Ellis, J., Kilpatrick, D., DeMayer, G.: Selective Clearance of Macrophages in Atherosclerotic Plaques by Autophagy, J Am Coll Cardiol49, 706, 2007
Elastase: 5 u/ml
小鼠小鼠, adult, 6-12 weekCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.1%see referenceShioya, T: A Simple Technique for Isolating Healthy Heart Cells from Mouse Models., J Physiol Sci 57, 327-35, 2007
Trypsin: 0.006%
Protease XIV: 0.006%
小鼠小鼠Ventricular myocytes and mesenteric arterial SMCCollagenase Type 2: 0.06%Krebs-RingerLu Tong, Ye Dan, Wang Xiaoli, Seubert John M, Graves Joan P, Bradbury J Alyce, Zeldin Darryl C, Lee Hon-Chi: Cardiac and vascular KATP channels in rats are activated by endogenous epoxyeicosatrienoic acids through different mechanisms, J Physiol 575, 627-44, 2006
Papain: 0.175%
小鼠小鼠CardiomyocytesCollagenase Type 1: 0.17%PBSChen, H., Yong, W., Ren, S., Shen, W., He, Y., Cox, K., Zhu, W., Li, W., Soonpaa, M., Payne, RM, Franco, D., Field, L., Rosen, V., Wang, Y. and Shou, W.: Overexpression of Bone Morphogenetic Protein 10 in Myocardium Disrupts Cardiac Postnatal Hypertrophic Growth., J Biol Chem 281, 27481, 2006
小鼠小鼠, neonatalCardiomyoctesCollagenase Type 1: 150 u/mlM199Takahashi N, Wang X, Tanabe S, Uramoto H, Jishage K, Uchida S, Sasaki S, Okada Y.: ClC-3-independent sensitivity of apoptosis to Cl- channel blockers in mouse cardiomyocytes, Cell Physiol Biochem 15, 263, 2005
Trypsin: 0.01%
小鼠小鼠, 1 dayCardiomyoctesNCIS kit: per instructionsEBSSPotts, Malia B., Vaughn, Allyson E., McDonough, Holly, Patterson, Cam, and Deshmukh, Mohanish: Reduced Apaf-1 levels in cardiomyocytes engage strict regulation of apoptosis by endogenous XIAP, J Cell Biol 171, 925, 2005
小鼠小鼠Aortic endothelialCollagenase Type 2: 0.2%DMEMKobayashi, M., Inoue, K., Warabi, E., Minami, T. and Kodama, T.: A Simple Method of Isolating Mouse Aortic Endothelial Cells., J Atheroscler Thromb 12, 138, 2005
小鼠小鼠Smooth muscle cellsCollagenase Type 1: 0.1%DMEMFukumoto Yoshihiro, Deguchi Jun-o, Libby Peter, Rabkin-Aikawa Elena, Sakata Yasuhiko, Chin Michael T, Hill Christopher C, Lawler Patrick R, Varo Nerea, Schoen Frederick J, Krane Stephen M, Aikawa Masanori:Genetically determined resistance to collagenase action augments interstitial collagen accumulation in atherosclerotic plaques, Circulation 110, 1953-9, 2004
Elastase: 0.0125%
小鼠小鼠, female, 14-18 gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.02%see referenceZhang Sui, Wang Dachun, Estrov Zeev, Raj Sean, Willerson James T, Yeh Edward T H: Both cell fusion and transdifferentiation account for the transformation of human peripheral blood CD34-positive cells into cardiomyocytes in vivo, Circulation 110, 3803-7, 2004
Elastase: 0.03%
Pancreatin: 0.06%
小鼠小鼠, 6-8 weekVascular smooth musclePapain: 10 u/mlEBSSQian, Q., Hunter, L., Li, M., Marin-Padilla, M., Prakash, Y., Somlo, S., Harris, P., Torres, V., and Sieck, G.: Pkd2 Haploinsufficiency Alters Intracellular Calcium Regulation in Vascular Smooth Muscle Cells, Hum Mol Genet 12(15), 1875, 2003
Elastase: .005%
Collagenase: 0.05%
Deoxyribonuclease I: 1000 u/ml
PDS kit: with modifications
小鼠小鼠CardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.2%DMEM/F-12Rybkin, I., Markham, D., Yan, Z., Bassel-Duby, R., Williams, R., and Olson, E.: Conditional Expression of SV40 T-antigen in Mouse Cardiomyocytes Facilitates an Inducible Switch from Proliferation to Differentiation, J Biol Chem 278(18), 15927, 2003
Pancreatin: 0.06%
小鼠小鼠, neonatal 2-4 dayAtrial myocytesNCIS kit: with modifications see referenceL-15Bettahi, I,, Marker, C., Roman, M., and Wickman, K.: Contribution of the Kir3.1 Subunit to the Muscarinic-gated Atrial Potassium Channel IKACh, J Biol Chem 277, 48282, 2002
小鼠小鼠, neonatal and adultCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.03-0.2%Joklik's MEMSchreiber, K., Paquet, L., Allen, B., and Rindt, H.: Protein Kinase C Isoform Expression and Activity in the Mouse Heart, Am J Physiol Heart Circ Physiol281(5), H2062, 2001
小鼠小鼠, NTg and Tg, 8 - 12 weekMyocytesCollagenase Type 2: 150 u/mlJoklik's MEMNelson, D., Setser, E., Hall, D., Schwartz, S., Hewitt, T., Klevitsky, R., Osinska, H., Bellgrau, D., Duke, R., and Robbins, J.: Proinflammatory Consequences of Transgenic Fas Ligand Expression in the Heart, J Clin Invest 105 (9), 1199, 2000
小鼠小鼠, 1-6 dayCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.1%PBSWatzka SB, Lucien J, Shimada M, Edwards V, Yeger H, Hannigan G, and Coles JG.: Selection of viable cardiomyocytes for cell transplantation using three-dimensional tissue culture, Transplantation 70, 1310, 2000
Deoxyribonuclease I: 0.002%
小鼠小鼠, 2-4 moVentricular myocytesCollagenase Type 2: 0.05%MEMZhou YY, Wang SQ, Zhu WZ, Chruscinski A, Kobilka BK, Ziman B, Wang S, Lakatta EG, Cheng H, Xiao RP: Culture and adenoviral infection of adult mouse cardiac myocytes: methods for cellular genetic physiology, Am J Physiol Heart Circ Physiol 279, H429-36, 2000
Collagenase Type 4: 0.05%
Protease XIV: 0.002%
小鼠小鼠CardiomyocytesCollagenase Type 2: 150 u/mlJoklik's MEMChristensen G, Minamisawa S, Gruber PJ, Wang Y, Chien KR: High-efficiency, long-term cardiac expression of foreign genes in living mouse embryos and neonates, Circulation 101, 178-84, 2000
小鼠小鼠, 1-3 dayCardiomyocytesTrypsin: 0.25%FBS-MEMWang, G., and Kang, Y.: Inhibition of Doxorubicin Toxicity in Cultured Neonatal Mouse Cardiomyocytes with Elevated Metallothionein Levels, J Pharmacol Exp Ther 288(3), 938, 1999
小鼠小鼠, 1 dayCardiomyocytesNCIS kit: with modifications see referenceL-15Lader, A., Kwiatkowski, D., and Cantiello, H.: Role of Gelsolin in the Actin Filament Regulation of Cardiac L-type Calcium Channels, Am J Physiol 277, C1277, 1999
小鼠小鼠, 3-7 monthFibroblasts, mesangial, smooth muscleTrypsin: 0.25%DMEMBradshaw AD, Francki A, Motamed K, Howe C, Sage EH: Primary mesenchymal cells isolated from SPARC-null mice exhibit altered morphology and rates of proliferation, Mol Biol Cell 10, 1569-79, 1999
Collagenase: see reference
Soybean Trypsin Inhibitor: .05%
小鼠小鼠 (BALB/c), adultMyocytesCollagenase Type 2: 0.04%Tyrode's solutionFelzen, B., Shilkrut, M., Less, H., Sarapov, I., Maor, G., Coleman, R., Robinson, R., et al.: Fas (CD95/Apo-1)-Mediated Damage to Ventricular Myocytes Induced by Cytotoxic T Lymphocytes from Perforin-Deficient Mice,Circ Res 82, 438, 1998
小鼠小鼠, 1 dayCardiomyocytesNCIS kit: with modifications see referenceL-15Lader, A., Xiao, Y., Ishikawa, Y., Cui, Y., Vatner, D., Vatner, S., Homcy, C., Cantiello, H.: Cardiac Gsalpha Overexpression Enhances L-type Calcium Channels Through an Adenylyl Cyclase Independent Pathway, Proc Natl Acad Sci U S A 95, 9669, 1998
小鼠小鼠, P0-P1CardiomyocytesCollagenase: 0.045%DMEM, Medium 199Arber, S., Hunter, J., Ross, J., Hongo, M., Sansig, G., Borg, J., Perriard, J., Chien, K., and Caroni, P.: MLP-Deficient Mice Exhibit a Disruption of Cardiac Cytoarchitectural Organization, Dilated Cadiomyopathy, and Heart Failure,Cell 88, 393, 1997
小鼠小鼠, 6-9 or 21-41 dayVentricular and atrial myocytesCollagenase Type 2: 95 u/mlDMEM/TyrodesValenzuela, D., Han, X., Mende, U., Fankhauser, C., Mashimo, H., Huang, P., Pfeffer, J., Neer, E., and Fishman, M.: G alpha(o) is Necessary for Muscarinic Regulation of Ca2+ Channels in Mouse Heart, Proc Natl Acad Sci U S A 94(5), 1727, 1997
Hyaluronidase: 172.5 u/ml
Trypsin: 0.002%
Deoxyribonuclease I: 60u/ml
小鼠小鼠CardiomyocyteCollagenase: 0.17 %PBSSoonpaa, M., Kim, K., Pajak, aL., Franklin, M., and Field, L.:Cardiomyocyte DNA Synthesis and Binucleation During Murine Development,Am J Physiol 271, H2183, 1996
小鼠小鼠 embryosMyocytesCollagenase Type 1: 0.1%DMEMWobus, A., Kleppisch, T., Maltsev, V., and Hescheler, J.: Cardiomyocyte-Like Cells Differentiated In Vitro From Embryonic Carcinoma Cells P19 are Characterized by Functional Expression of Adrenoceptors and Ca2+ Channels,In Vitro Cell Dev Biol 30A, 425, 1994
小鼠小鼠 MyocytesTrypsin NF 1:250: 0.25%Rinaldini's buffer solution, CFGross, W., Schopf-Ebner, E., and Bucher, O.: Technique for the Preparation of Homogeneous Cultures of Isolated Heart Muscle Cells, Exp Cell Res 53, 1, 1968
(also rat, neonate and chick, 8 day embryo)
綿羊綿羊Atrial myocytesCollagenase Type 2: 0.055%Tyrode's solutionVoigt, N., Pearman, C., Dobrev, D. and Dibb, K.: Methods for Isolating Atrial Cells from Large Mammals and Humans., J Mol Cell Cardiol 86, 187-98, 2015
Protease XIV: 0.006%
綿羊綿羊CardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.055%See referenceDibb, K., Clarke, J., Horn, M., Richards, M., Graham, H., Eisner, D. and Trafford, A.: Characterization of an Extensive Transverse Tubular Network in Sheep Atrial Myocytes and its Depletion in Heart Failure., Circ Heart Fail 2, 482-9, 2009
Protease Type XIV: 0.006%
綿羊綿羊CardiomyocytesCollagenase Type 2: 100-200 u/mlSee referenceDhamoon, A, Pandit, S., Sarmast, F., Parisian, K., Guha, P., Li, Y., Bagwe, S., Taffet, S. and Anumonwo, J.: Unique Kir2.x Properties Determine Regional and Species Differences in the Cardiac Inward Rectifier K+ Current.,Circ Res 94, 1332-9, 2004
Aortic smooth muscle and intersitial cellsCollagenase: 600 u/mlPBSButcher, J. and Nerem, R.: Porcine Aortic Valve Interstitial Cells in Three-Dimensional Culture: Comparison of Phenotype with Aortic Smooth Muscle Cells., J Heart Valve Dis 13, 478, 2004
Coronary vascular smooth muscle (PCVSMCs)Trypsin: 0.037%HEPESChrist, M., Gunther, A., Heck, M., Schmidt, B., Falkenstein, E., and Wehling, M.: Aldosterone, Not Estradiol, Is the Physiological Agonist for Rapid Increases in cAMP in Vascular Smooth Muscle Cells, Circulation 99, 1485, 1999
Miniature swine, adult, female, 25-40 kg, familiarized with treadmill exerciseCoronary smooth muscleTrypsin: 0.1%Krebs bicarbonate solutionBowles, D., Hu, Q., Laughlin, M., and Sturek, M.: Exercise Training Increases L-type Calcium Current Density in Coronary Smooth Muscle, Am J Physiol 275 (44), H2159, 1998
兔, New Zealand, 2.3-2.9 kgCardiomyocytesCollagenase Type 1: 0.05%Krebs-HenseleitFarkas, A., Acsai, K., Nagy, N., Toth, A., Fulop, F., Seprenyi, G., Birinyi, P., Nanasi, P., Forster, T., Csanady, M., Papp, J., Varrro, A. and Farkas, A.:Na(+)/Ca(2+) Exchanger Inhibition Exerts a Positive Inotropic Effect in the Rat Heart, but Fails to Influence the Contractility of the Rabbit Heart., Br J Pharmacol 154, 93, 2008
Hyaluronidase: see reference
Protease: see reference
Smooth muscle cellsCollagenase Type 2: 300 u/mlF10 HamVerheye, S., Martinet, W., Kockx, M., Knaapen, M., Salu, K., Timmermans, J., Ellis, J., Kilpatrick, D., DeMayer, G.: Selective Clearance of Macrophages in Atherosclerotic Plaques by Autophagy, J Am Coll Cardiol49, 706, 2007
Elastase: 5 u/ml
兔, New Zealand, 2 kgCardiomyocytes and fibroblastsCollagenase: 0.06%Medium 199Driesen Ronald B, Dispersyn Gerrit D, Verheyen Fons K, van den Eijnde Stefan M, Hofstra Leo, Thone Fred, Dijkstra Petra, Debie Wiel, Borgers Marcel, Ramaekers Frans C S: Partial cell fusion: a newly recognized type of communication between dedifferentiating cardiomyocytes and fibroblasts,Cardiovasc Res 68, 37-46, 2005
兔, New Zealand White, 2-3 kgMyocytesCollagenase Type 2: 0.1%HEPESSpitzer, K., Ershler, P., Skolnick, R., and Vaughan-Jones, R.: Generation of Intracellular pH Gradients in Single Cardiac Myocytes with a Microperfusion System, Am J Physiol 278, H1371, 2000
兔, New Zealand, white, either sexMyocytesCollagenase Type 2: 0.05%EGTA-KBSedarat, F., Xu, L., Moore, E., and Tibbits, G.: Colocalization of Dihydropyridine and Ryanodine Receptors in Neonate Rabbit Heart Using Confocal Microscopy, Am J Physiol Heart Circ Physiol 279, H202, 2000
兔, adult 1.5-2.5 kgTricuspid valve cellsCollagenase: 0.8 mg/mlHEPES Tyrode solutionAnumonwo JM, Delmar M, and Jalife J.: Electrophysiology of single heart cells from the rabbit tricuspid valve, J Physiol 425, 145, 1990
兔, New Zealand, white, male, 2-3 kgCardiomyocytesHyaluronidase: 0.5%Eagle's MEMBuxton, I., and Brunton, L.: Compartments of Cyclic AMP and Protein Kinase in Mammalian Cardiomyocytes, J Biol Chem 258 (17), 10233, 1983
兔, adult, 2 kgMyocytesHyaluronidase: 0.007%Kreb's RingerDani, A., Cittadini, A., Flamini, G., Festuccia, G., and Terranova, T.:Preparation and Some Properties of Isolated Beating Myocytes from Adult Rabbit Heart, J Mol Cell Cardiol 9, 777, 1977
大鼠大鼠, 1-2 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsMEMXie, L., Pi, X., Townley-Tilson, WH., Li, N., Wehrens, X., Entman, M., Taffet, G., Mishra, A., Peng, J., Schisler, J., Meissner, G. and Patterson, C.: PHD2/3-dependent Hydroxylation Tunes Cardiac Response to 尾-adrenergic Stress via Phospholamban., J Clin Invest 125, 2759-71, 2015
大鼠大鼠, Wistar, 250-350gVentricular myocytesCollagenase Type 2: 251 u/mlTyrode solutionCalderon-Sachez, E., Domi璶guez-Rodriguez, A., Lopez-Haldon, J., Jimenez-Navarro, M., Gomez, A., Smani, T. and Ordonez, A.:Cardioprotective Effect of Ranolazine in the Process of Ischemia-reperfusion in Adult Rat Cardiomyocytes., Rev Esp Cardiol (Engl Ed) , , 2015
大鼠大鼠, SD, 8-10 weekVentricular myocytesCollagenase: 0.08%Tyrode's SolutionLee, J., Ha, J. and Leem, C.: A Novel Nicotinamide Adenine Dinucleotide Correction Method for Mitochondrial Ca(2+) Measurement with FURA-2-FF in Single Permeabilized Ventricular Myocytes of Rat., Korean J Physiol Pharmacol 19, 373-82, 2015
Pronase: 0.004%
大鼠大鼠, SD, 1 dayCardiomyocytesTrypsin: 0.025%HBSSClark, A. and Naya, F.: MicroRNAs in the Myocyte Enhancer Factor 2 (MEF2)-regulated Gtl2-Dio3 Noncoding RNA Locus Promote Cardiomyocyte Proliferation by Targeting the Transcriptional Coactivator Cited2., J Biol Chem 290, 23162-72, 2015
Collagenase Type 2: 1.0%
大鼠大鼠, SD, 2-3 dayCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%DMEMFang, R, Qiao, S., Liu, Y., Meng, Q., Chen, X., Song, B., Hou, X. and Tian, W.: Sustained Co-Delivery of BIO and IGF-1 by a Novel Hybrid Hydrogel System to Stimulate Endogenous Cardiac Repair in Myocardial Infarcted Rat Hearts., Int J Nanomedicine 10, 4691-703, 2015
大鼠大鼠, SDValve Interstitial cellsCollagenase Type 2: 600 u/mlDMEMHorne, T., VandeKopple, M., Sauls, K., Koenig, S., Anstine, L., Garg, V., Norris, R. and Lincoln, J.: Dynamic Heterogeneity of the Heart Valve Interstitial Cell Population in Mitral Valve Health and Disease, J Cardiovasc Dev Dis 2, 214, 2015
大鼠Wistar, 200 gVentricular myocytesCollagenase Type 2: 95 u/mlHEPESMiller, L., Greensmith, D., Sankaranarayanan, R., O'Neill, S. and Eisner D.:The Effect of 2,5-di-(tert-butyl)-1,4-benzohydroquinone (TBQ) on Intracellular Ca2+ Handling in Rat Ventricular Myocytes., Cell Calcium 58, 208-14, 2015
Protease: 0.1 u/ml
大鼠大鼠, SD, 3-4 monthCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.1%DMEMLiu, L., Wang, Y., Cao, Z., Wang, M., Liu, X., Gao, T., Hu, Q., Yuan, W. and Lin, L.: Up-regulated TLR4 in Cardiomyocytes Exacerbates Heart Failure after Long-Term Myocardial Infarction., J Cell Mol Med 19, 2728, 2015
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsHBSSSong, D., Lee, K., Ryu, J., Jeon, H. and Kim, D.: The Molecular Interaction of Heart LIM Protein (HLP) with RyR2 and Caveolin-3 is Essential for Ca(2+)-Induced Ca(2+) Release in the Heart., Biochem Biophys Res Commun 463, 975-81, 2015
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesTrypsin: 0.06%HBSSZhang, B., Montgomery, M., Davenport-Huyer, L., Korolj, A. and Radisic, M.: Platform Technology for Scalable Assembly of Instantaneously Functional Mosaic Tissues., Sci. Adv. 1, e1500423, 2015
Collagenase Type 2: 220 u/ml
大鼠大鼠CardiomyocytesCollagenase Type 2: 150 u/mlMEMHennessey, J., Wei, E. and Pitt, G.: Fibroblast Growth Factor Homologous Factors Modulate Cardiac Calcium Channels., Circ Res 113, 381-8, 2013
大鼠大鼠, Wistar, 175-200gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 150 u/mlsee referenceEckerle, L., Felix, S. and Herda, L.: Measurement of Antibody Effects on Cellular Function of Isolated Cardiomyocytes., J Vis Exp 73, e4237, 2013
大鼠大鼠, SD, 1-2 dayCardiomyocytesTrypsin: 0.06%DMEMZhang, B., Green, J., Murthy, S. and Radisic, M.: Label-Free Enrichment of Functional Cardiomyocytes using Microfluidic Deterministic Lateral Flow Displacement., PLoS ONE 7, e37619, 2012
Collagenase Type 2: 220 u/ml
大鼠大鼠, adultVentricular myocytesCollagenase Type 2: 0.2%Medium 199Karakikes, I., Hadri, L., Rapti, K., Ladage, D., Ishikawa, K., Tilemann, L., Yi, G., Morel, C., Gwathmey, J., Zsebo, K., Weber, T., Kawase, Y. and Hajjar, R.: Concomitant Intravenous Nitroglycerin with Intracoronary Delivery of AAV1.SERCA2a Enhances Gene Transfer in Porcine Hearts., Mol Therapy 20, 565, 2012
大鼠大鼠, 3 dayCardiomyocytesCollagenase Type 2: 300 u/mlPBSYe, K., Sullivan, K. and Black, L.: Encapsulation of Cardiomyocytes in a Fibrin Hydrogel for Cardiac Tissue Engineering., J Vis Exp 55, 3251, 2011
大鼠大鼠, SD, maleCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.056%KrebsMellor, K., Bell, J., Wendt, I., Davidoff, A., Ritchie, R. and Delbridge, L.:Fructose Modulates Cardiomyocyte Excitation-Contraction Coupling and Ca Handling In Vitro., PLoS ONE 6, e25204, 2011
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Dittami, G., Rajguru, S., Lasher, R., Hitchcock, R. and Rabbitt, R.:Intracellular Calcium Transients Evoked by Pulsed Infrared Radiation in Neonatal Cardiomyocytes., J Physiol 589, 1295-306, 2011
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesTrypsin: 0.07%DMEM/M199Guan, X., Delo, D., Atala, A. and Soker, S.: In Vitro Cardiomyogenic Potential of Human Amniotic Fluid Stem Cells., J Tissue Eng Regen Med 5, 220, 2011
Collagenase Type 2: 0.1%
大鼠大鼠, adultCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.025%see referenceLouch, W., Sheehan, K. and Wolska, B.: Methods in Cardiomyocyte Isolation, Culture, and Gene Transfer., J Mol Cell Cardiol 51, 288-98, 2011
大鼠大鼠, Wistar, maleCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Brinckmann, M., Kaschina, E., Altarche-Xifro, W., Curato, C., Timm, M., Grzesiak, A., Dong, J., Kappert, K., Kintscher, U., Unger, T. and Li, J.:Estrogen Receptor Alpha Supports Cardiomyocytes Indirectly Through Post-Infarct Cardiac c-kit+ Cells., J Mol Cell Cardiol 47, 66, 2009
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Smith, M., Huang, Y. and Deshmukh, M.: Skeletal Muscle Differentiation Evokes Endogenous XIAP to Restrict the Apoptotic Pathway., PLoS ONE 4, e5097, 2009
大鼠大鼠, adultMyocytesCollagenase Type 2: 0.05%Media 199Xu, X. and Colecraft, H.: Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes., J Vis Exp 28, 1308, 2009
Protease XIV: 0.02%
大鼠大鼠, SD, 200-250 gCardiomyocytesCollagenase Type 1: 0.05%Krebs-HenseleitFarkas, A., Acsai, K., Nagy, N., Toth, A., Fulop, F., Seprenyi, G., Birinyi, P., Nanasi, P., Forster, T., Csanady, M., Papp, J., Varrro, A. and Farkas, A.:Na(+)/Ca(2+) Exchanger Inhibition Exerts a Positive Inotropic Effect in the Rat Heart, but Fails to Influence the Contractility of the Rabbit Heart., Br J Pharmacol 154, 93, 2008
Hyaluronidase: see reference
Protease: see reference
大鼠大鼠, SD, 1-2 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Kim, M., Oh, J., Sakata, S., Liang, I., Park, W., Hajjar, R. and Lebeche, D.:Role of Resistin in Cardiac Contractility and Hypertrophy., J Mol Cell Cardiol 45, 270, 2008
大鼠大鼠, SD, 2 dayCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.1%DMEM/F-12Jang, J., Ku, S., Kim, J., Choi, K., Kim, Y., Kim, H., Oh, S., Lee, E., Cho, H., Song, Y., Lee, S., Lee, S., Suh, C., Kim, S., Moon, S. and Choi, Y.: Notch Inhibition Promotes Human Embryonic Stem Cell-Derived Cardiac Mesoderm Differentiation., Stem Cells 26, 2782, 2008
大鼠大鼠, SD, male, 225-250gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.1%J-MEMKubli, D., Quinsay, M., Huang, C., Lee, Y., Gustafsson, A.: Bnip3 Functions as a Mitochondrial Sensor of Oxidative Stress During Myocardial Ischemia and Reperfusion., Am J Physiol Heart Circ Physiol 295, H2025, 2008
大鼠大鼠, 2-3 dayCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%DMEMLaFramboise, W., Scalise, D., Stoodley, P., Graner, S., Guthrie, R., Magovern, J and Becich, M.: Cardiac Fibroblasts Influence Cardiomyocyte Phenotype in Vitro., Am J Physiol Cell Physiol 292, C1799-808, 2007
Pancreatin: 0.1%
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Robinet, A., Millart, H., Oszust, F., Hornebeck, W. and Bellon, G.: Binding of Elastin Peptides to S-Gal Protects the Heart Against Ischemia/Reperfusion Injury by Triggering the RISK Pathway., FASEB J 21, 1968, 2007
大鼠大鼠, SD, 300-350 gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%DMEMNiederbichler Andreas D, Hoesel Laszlo M, Westfall Margaret V, Gao Hongwei, Ipaktchi Kyros R, Sun Lei, Zetoune Firas S, Su Grace L, Arbabi Saman, Sarma J Vidya, Wang StewartC, Hemmila MarkR, Ward PeterA:An essential role for complement C in the pathogenesis of septic cardiac dysfunction, J Exp Med 203, 53-61, 2006
Hyaluronidase: 0.02%
大鼠大鼠, SD, maleVentricular myocytesCollagenase: 0.13%DMEMStagg Mark A, Coppen Steven R, Suzuki Ken, Varela-Carver Anabel, Lee Joon, Brand Nigel J, Fukushima Satsuki, Yacoub Magdi H, Terracciano Cesare M: Evaluation of frequency, type, and function of gap junctions between skeletal myoblasts overexpressing connexin43 and cardiomyocytes: relevance to cell transplantation, FASEB J 20, 744-6, 2006
Hyaluronidase: 0.06%
大鼠大鼠, SD, 200-250 gVentricular myocytes and mesenteric arterial SMCCollagenase Type 2: 0.06%Krebs-RingerLu Tong, Ye Dan, Wang Xiaoli, Seubert John M, Graves Joan P, Bradbury J Alyce, Zeldin Darryl C, Lee Hon-Chi: Cardiac and vascular KATP channels in rats are activated by endogenous epoxyeicosatrienoic acids through different mechanisms, J Physiol 575, 627-44, 2006
Papain: 0.175%
大鼠大鼠, Wistar, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Butler, T., Au, C., Yang, B., Egan, J., Tan, Y., Hardeman, E., North, K., Verkman, A. and Winlaw, D.: Cardiac Aquaporin Expression in Humans, Rats, and Mice., Am J Physiol Heart Circ Physiol 291, H705, 2006
大鼠大鼠, 1-2 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsDMEM/F-12Pedram, A., Razandi, M., Aitkenhead, M., and Levin, E: Estrogen Inhibits Cardiomyocyte Hypertrophy in vitro. Antagonism of Calcineurin-related Hypertrophy through Induction of MCIP1, J Biol Chem 280, 26339, 2005
大鼠大鼠, SD, male, 250-300 gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 250 u/mlCardioplegic solutionHead, B., Pa, H., Roth, D., Lai, N., Niesman, I., Farquhar, M. and Insel, P.: G-Protein-Coupled Receptor Signaling Components Localize in Both Sarcolemmal and Intracellular Caveolin-3-Associated Microdomains in Adult Cardiac Myocytes., J Biol Chem 280, 31036-44, 2005
大鼠大鼠, Wistar, 1-3 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Castillo, A., Ruzmetov, N., Harvey, K., Stillwell, W., Zaloga, G. and Siddiqui, R.: Docosahexaenoic Acid Inhibits Protein Kinase C Translocation/Activation and Cardiac Hypertrophy in Rat Cardiomyocytes., J Mol Genet Med 1, 18, 2005
大鼠大鼠, SD, 2-4 dayCardiomyocytes, fibroblastsTrypsin: 0.1%Medium 199Entcheva, E., Bien, H, Yin L., Chung, C., Farrell, M., and Kostov, Y.:Functional Cardiac Cell Constructs on Cellulose-based Scaffolding,Biomaterials 25(26), 5753, 2004
Collagenase: 0.1%
大鼠大鼠, SD, 1-2 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Muller-Bore, B., Cascio, W., Anderson, P., Snowwaert, J., Frye, J., Desai, N., Esch, G., Brackham, J., Bagnell, C., Coleman, W., Grisham, J., and Malouf, N.: Adult-derived Liver Stem Cells Acquire a Cardiomyocyte Structural and Functional Phenotype ex vivo, Am J Pathol 165, 135, 2004
大鼠大鼠,1-2 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsDMEMNatarajan AR, Rong Q, Katchman AN, and Ebert SN.: Intrinsic cardiac catecholamines help maintain beating activity in neonatal rat cardiomyocyte cultures, Pediatr Res 56, 411, 2004
大鼠大鼠, 1 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsF-10Chen, Z., Ge, Y., and Kang J.: Down-regulation of the M6P/IGF-II Receptor Increases Cell Proliferation and Reduces Apoptosis in Neonatal Rat Cardiac Myocytes, BMC Cell Biol 5, 15, 2004
大鼠大鼠, neonatalCardiac myocytesCollagenase Type 2: 0.5%HBSSChen Hsiao-Huei, Mullett Steven J, Stewart Alexandre F R: Vgl-4, a novel member of the vestigial-like family of transcription cofactors, regulates alpha1-adrenergic activation of gene expression in cardiac myocytes, J Biol Chem 279, 30800-6, 2004
大鼠大鼠, male, 250-300 gCardiomyocytesCollagenase Type 1: 0.03%HBSSHunton DaciaL, Zou LuYun, Pang Yi, Marchase Richard B: Adult rat cardiomyocytes exhibit capacitative calcium entry, Am J Physiol Heart Circ Physiol 286, H1124-32, 2004
Protease: 0.01%
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.1%DMEMTamamori-Adachi, M., Hayashida, K., Nobori, K., Omizu, C., Yamada, K., Sakamoto, N., Kamura, T., Fukuda, K., Ogawa, S., Nakayama, K. and Kitajima, S.: Down-Regulation of p27 Promotes Cell Proliferation of Rat Neonatal Cardiomyocytes Induced by Nuclear Expression of Cyclin D1 and CDK4, J Biol Chem 2279, 50429, 2004
大鼠大鼠, fetal or 3-dayCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.1%HEPESTamamori-Adachi Mimi, Ito Hiroshi, Sumrejkanchanakij Piyamas, Adachi Susumu, Hiroe Michiaki, Shimizu Masato, Kawauchi Junya, Sunamori Makoto, Marumo Fumiaki, Kitajima Shigetaka, Ikeda Masa-Aki: Critical role of cyclin D1 nuclear import in cardiomyocyte proliferation, Circ Res 92, e12-9, 2003
大鼠大鼠, adult, 220-280gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 178 u/mlKrebs-Henseleit, CFGordon Jennifer M, Dusting Gregory J, Woodman Owen L, Ritchie Rebecca H: Cardioprotective action of CRF peptide urocortin against simulated ischemia in adult rat cardiomyocytes, Am J Physiol Heart Circ Physiol 284, H330-6, 2003
Hyaluronidase: 0.01%
大鼠大鼠, 50 gVentricular myocytesCollagenase: 223 u/mlMedium 199Aberle II NS, and Ren J.: Experimental Assessment of the Role of Acetaldehyde in Alcoholic Cardiomyopathy, Biol Proced Online 5, 1, 2003
Hyaluronidase: 0.01%
Trypsin: 0.002%
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Li TS, Ito H, Kajiwara K, and Hamano K.: Long-term survival of xenografted neonatal cardiomyocytes by adenovirus-mediated CTLA4-Ig expression and CD40 blockade, Circulation 108, 1760, 2003
大鼠大鼠, SD, 200-300 gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05-0.1%Joklik's MEMSwift Luther, McHowat Jane, Sarvazyan Narine: Inhibition of membrane-associated calcium-independent phospholipase A2 as a potential culprit of anthracycline cardiotoxicity, Cancer Res 63, 5992-8, 2003
大鼠大鼠, SD, 175-200gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%Krebs-RingerTardif Annie, Julien Nathalie, Chiasson Jean-Louis, Coderre Lise:Stimulation of glucose uptake by chronic vanadate pretreatment in cardiomyocytes requires PI 3-kinase and p38 MAPK activation, Am J Physiol/Endo 284, E1055-64, 2003
Deoxyribonuclease I: 0.02%
大鼠大鼠, SD, pregnant femalePeritoneal mastHyaluronidase: 100 u/mlDMEM (see reference)DeAlmeida, A., Mustin, D., Forman, M., Brower, G., Janicki, J., and Carver, W.: Effects of mast cells on the behavior of isolated heart fibroblasts: modulation of collagen remodeling and gene expression, J Cell Physiol 191, 51, 2002
大鼠大鼠, neonatal, adult, 17 dayVentricular cardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.7-1%DMEMLam ML, Bartoli M, and Claycomb WC.: The 21-day postnatal rat ventricular cardiac muscle cell in culture as an experimental model to study adult cardiomyocyte gene expression, Mol Cell Biochem 229, 51, 2002
大鼠大鼠, 1 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Yang Y, Liao H, Ke Q, Cai J, Xiao YF, and Morgan JP: Enhancement of nitric oxide production by methylecgonidine in cultured neonatal rat cardiomyocytes, Br J Pharmacol 135, 188, 2002
大鼠大鼠, female, 250-300 gVentricular myocytesCollagenase Type 2: 0.1%Ringer solutionLiu Qinghang, Hofmann Polly A: Antiadrenergic effects of adenosine A(1) receptor-mediated protein phosphatase 2a activation in the heart, Am J Physiol Heart Circ Physiol 283, H1314-21, 2002
大鼠大鼠, Wistar, 1 dayCardiomyocytesCollagenase Type 2: 80u/mlM199Shimizu Tatsuya, Yamato Masayuki, Isoi Yuki, Akutsu Takumitsu, Setomaru Takeshi, Abe Kazuhiko, Kikuchi Akihiko, Umezu Mitsuo, Okano Teruo: Fabrication of pulsatile cardiac tissue grafts using a novel 3-dimensional cell sheet manipulation technique and temperature-responsive cell culture surfaces, Circ Res 90, e40, 2002
大鼠大鼠, male, 6-12 months oldCardiac myocytesProtease: 0.55 u/mlTyrode's solutionKitta, K., Day, R., Ikeda, T., and Suzuki, Y.: Hepatocyte Growth Factor Protects Cardiac Myocytes Against Oxidative Stress-Induced Apoptosis, Free Radic Biol Med 31 (7), 902, 2001
大鼠大鼠, Harlan SD, pupCardiomyocytesTrypsin: DMEM/Ham's F-12Schwartzbauer, G., and Robbins, J.: The Tumor Suppressor Gene PTEN Can Regulate Cardiac Hypertrophy and Survival, J Biol Chem 276, 35786, 2001
大鼠大鼠, SD, newbornCardiac myocytesNCIS kit: per instructionsL-15Rahman A, Alam M, Rao S, Cai L, Clark LT, Shafiq S, and Siddiqui MA:Differential effects of doxorubicin on atrial natriuretic peptide expression in vivo and in vitro, Biol Res 34(3-4), 195, 2001
大鼠大鼠, adultVentricular myocytesCollagenase: 223 u/mlTyrode solutionRen J, and Wold LE.: Measurement of Cardiac Mechanical Function in Isolated Ventricular Myocytes from Rats and Mice by Computerized Video-Based Imaging, Biol Proced Online 3, 43, 2001
Hyaluronidase: 0.01%
Trypsin: 0.002%
大鼠大鼠, SD, maleCardiomyocytesCollagenase Type 2: 140 u/mlKrebs-HenseleitDai L, Brookes PS, Darley-Usmar VM, and Anderson PG.: Bioenergetics in cardiac hypertrophy: mitochondrial respiration as a pathological target of NO, Am J Physiol/Heart 281, H2261-H2269, 2001
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsDMEM/M199Guo K, Searfoss G, Krolikowski D, Pagnoni M, Franks C, Clark K, Yu KT, Jaye M, Ivashchenko Y: Hypoxia induces the expression of the pro-apoptotic gene BNIP3, Cell Death Differ 8, 367-76, 2001
大鼠大鼠, Wistar, femaleVentricular myocytesCollagenase Type 2: 0.1%Ringer solutionPyle, W, Lester, J, and Hofmann, P.: Effects of Kappa-opioid receptor activation of myocardium, Am J Physiol Heart Circ Physiol 281, H669, 2001
大鼠大鼠, SD, 1-2 dayCardiomyocytesTrypsin: 0.01%HBSSArutunyan A, Webster D, Swift L, Sarvazyan N: Localized injury in cardiomyocyte network: a new experimental model of ischemia-reperfusion arrhythmias, Am J Physiol Heart Circ Physiol 280, H1905-15, 2001
Collagenase Type 2: 0.08%
大鼠大鼠, newbornAtrialTrypsin: 0.06%DMEMKim, D., and Pleumsamran, A.: Cytoplasmic Unsaturated Free Fatty Acids Inhibit ATP-Dependent Gating of the G Protein-gated K+ Channel, J Gen Physiol 115, 287, 2000
大鼠大鼠, 1-2 dayCardiomyocytesCollagenase Type 1: 84 u/mlM199 mediumBueno OF, De Windt LJ, Tymitz KM, Witt SA, Kimball TR, Klevitsky R, Hewett TE, Jones SP, Lefer DJ, Peng CF, Kitsis RN, and Molkentin JD.: The MEK1-ERK1/2 signaling pathway promotes compensated cardiac hypertrophy in transgenic mice, EMBO J 19(23), 6341, 2000
Pancreatin: 0.05%
大鼠大鼠, Winstar, 1-2 dayVentricular myocytesCollagenase Type 2: 0.08%DMEMMaki T, Horio T, Yoshihara F, Suga S, Takeo S, Matsuo H, and Kangawa K: Effect of neutral endopeptidase inhibitor on endogenous atrial natriuretic peptide as a paracrine factor in cultured cardiac fibroblasts, Br J Pharmacol 131(6), 1204, 2000
大鼠大鼠, SD, adult femaleHeart microvascular cellsCLSPA: 250u/mlL-15Puri S, Bansal DD, Uskokovic MR, and MacGregor RR.: Induction of tissue plasminogen activator secretion from rat heart microvascular cells by fM 1,25(OH)(2)D(3), Am J Physiol/Endo 278(2), E293, 2000
Papain: 5 u/ml
Elastase: 0.8 u/ml
大鼠大鼠, SD, male, 250-300gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.06%M199Sun L, Chang J, Kirchhoff SR, and Knowlton AA.: Activation of HSF and selective increase in heat-shock proteins by acute dexamethasone treatment, Am J Physiol Heart Circ Physiol 278(4), H1091, 2000
大鼠大鼠, wistar, 2 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsDMEM-F12Cowan DB, Poutias DN, Del Nido PJ, and McGowan FX Jr: CD14-independent activation of cardiomyocyte signal transduction by bacterial endotoxin, Am J Physiol Heart Circ Physiol 279, H619, 2000
大鼠大鼠, neonatalCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsL-15Webster DR, and Patrick DL.: Beating rate of isolated neonatal cardiomyocytes is regulated by the stable microtubule subset, Am J Physiol Heart Circ Physiol 278, H1653, 2000
大鼠大鼠, Lewis, adult male, 300-350-gAorta, smooth muscleTrypsin: 0.025%Medium 199 with 20% FBS mediumKim, B., Nikolovski, J., Bonadio, J., Smiley, E., and Mooney, D.: Engineered Smooth Muscle Tissues: Regulating Cell Phenotype with the Scaffold, Exp Cell Res 251, 318, 1999
大鼠大鼠, 10-15 newborn, 1-2 days oldAtrialTrypsin: 0.03%HBSS or EBSSNemec, J., Wickman, K., and Clapham, D.: GBy Binding Increases the Open Time of IKACh: Kinetic Evidence for Multiple GBy Binding Sites, Biophys J 76, 246, 1999
大鼠大鼠, 1-3 dayNeonatal rat cardiomyocytesCollagenase Type 2: 80u/mlDMEM/F12Adderley SR, and Fitzgerald DJ.: Oxidative damage of cardiomyocytes is limited by extracellular regulated kinases 1/2-mediated induction of cyclooxygenase-2, J Biol Chem 274, 5038, 1999
Pancreatin: 0.06%
大鼠大鼠, 1-2 dayCardiomyocytesPancreatin: 0.06%DMEMReinecke H, Zhang M, Bartosek T, and Murry CE.: Survival, integration, and differentiation of cardiomyocyte grafts: a study in normal and injured rat hearts, Circulation 100(2), 193, 1999
Collagenase Type 2: 95 u/ml
大鼠大鼠, adult and neonatalCardioomyocytesCollagenase Type 4: 0.12%-adultDMEM/medium 199Richards SM, Jaconi ME, Vassort G, and Puceat M.: A spliced variant of AE1 gene encodes a truncated form of Band 3 in heart: the predominant anion exchanger in ventricular myocytes, J Cell Sci 112, 1519, 1999
Collagenase Type 2: 0.05%-neonatal
大鼠大鼠, Wistar, maleCardiomyocytesCollagenase Type 2: 228 u/mlJoklik MEMSambandam N, Abrahani MA, St Pierre E, Al-Atar O, Cam MC, and Rodrigues B.: Localization of lipoprotein lipase in the diabetic heart: regulation by acute changes in insulin, Arterioscler Thromb Vasc Biol 19(6), 1526, 1999
大鼠大鼠, 1-2 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsRPMIMatsui, T., Li, Ling, Del Monte, F., Fukui, Y., Franke, T., Hajjar, R., Rosenzweig, A.: Adenoviral gene transfer of activated phosphatidylinositol 3'-kinase and Akt inhibits apoptosis of hypoxic cardiomyocytes in vitro,Circulation 100, 2373-9, 1999
大鼠大鼠Thoracic aorta, smooth muscleElastase: 0.02%(see reference)Zilberman, A., Dave, V., Miano, J., Olson, E., and Periasamy, M.:Evolutionary Conserved Promoter Region Containing CArg-Like Elements is Crucial for Smooth Muscle Myosin Heavy Chain Gene Expression, Circ Res 82, 566, 1998
大鼠大鼠, SD, 1 dayCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsDMEM/F-12Wagner DR, Combes A, McTiernan C, Sanders VJ, Lemster B, Feldman AM: Adenosine inhibits lipopolysaccharide-induced cardiac expression of tumor necrosis factor-alpha, Circ Res 82, 47-56, 1998
大鼠大鼠, SD, 300-350 gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.04%see referenceYu L, Netticadan T, Xu YJ, Panagia V, Dhalla NS: Mechanisms of lysophosphatidylcholine-induced increase in intracellular calcium in rat cardiomyocytes, J Pharmacol Exp Ther 286, 1-8, 1998
大鼠大鼠, SD, female, 200gVentricular cardiac myocytesCollagenase Type 2: 0.5%Krebs-Henseleit bufferWestfall M V, Rust E M, Metzger J M: Slow skeletal troponin I gene transfer, expression, and myofilament incorporation enhances adult cardiac myocyte contractile function, Proc Natl Acad Sci U S A 94, 5444-9, 1997
Hyaluronidase: 0.2%
大鼠大鼠, Wistar, 1 dayCardiomyoctesCollagenase Type 2: 80 u/mlHBSSKinugawa, K., Kohmoto, O., Yao, A., Serizawa, T., and Takahashki, T.:Cardiac inducible nitric oxide synthase negatively modulates myocardial function in cultured rat myocytes, Am J Physiol 272, H35-47, 1997
大鼠大鼠, neonatal, 5-dayCardiomyocytesTrypsin: 0.05%DMEMVanwinkle, W., Snuggs, M., and Buja, L.: Cardiogel: A Biosynthetic Extracellular Matrix for Cardiomyocyte Culture, In Vitro Cell Dev Biol Anim 32, 478, 1996
大鼠大鼠, SD, 250-300 gCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.05%Joklik'sSharma VK, Colecraft HM, Wang DX, Levey AI, Grigorenko EV, Yeh HH, and Sheu SS: Molecular and functional identification of m1 muscarinic acetylcholine receptors in rat ventricular myocytes, Circ Res 79(1), 86, 1996
大鼠大鼠, SD, fetal and neonatalCardiomyocytesCollagenase: 0.1%PBSLi RK, Mickle DA, Weisel RD, Zhang J, Mohabeer MK: In vivo survival and function of transplanted rat cardiomyocytes, Circ Res 78, 283-8, 1996
Trypsin: 0.2%
大鼠SD, SHR or WKYCardiomyocytesNCIS kit: per instructionsHBSSMacGregor, R., Klein, R., and Bansal, D.: Secretion of Plasminogen Activator Activity from Neonatal Rat Heart Cells is Regulated by Hormones and Growth Factors, Ann N Y Acad Sci 752, 331, 1995
大鼠大鼠, SD, male, 200-250 gMyocytesCollagenase: 0.07%Joklik's MEMLaughlin, M., Schaeffer, M., and Sturek, M.: Effect of Exercise Training on Intracellular Free Ca2+ Transients in Ventricular Myocytes of Rats, Am J Physiol 73, 1141, 1992
Ventricles
大鼠大鼠, SD, female, 60-90 daysMyocardialCollagenase Type 2: 0.1%Joklik's MEM, Kreb's-Henseleit buffer, CFWelder, A.A., Grant, R., Bradlaw, J., and Acosta, D.: A Primary Culture System of Adult Rat Heart Cells for the Study of Toxicologic Agents, In Vitro Cell Dev Biol 27, 921, 1991
大鼠大鼠, SD, adult, female, 180-220 gCardiomyocytesCollagenase: 0.11%(see reference)Fischer, Y., Rose, H., and Kammermeier. H.: Highly Insulin-Responsive Isolated Rat Heart Muscle Cells Yielded By a Modified Isolation Method, Life Sci 49, 1679, 1991
大鼠大鼠, neonatal, 1-4 daysCardiomyocytesCollagenase Type 2: 0.12%Krebs-Henseleit Buffer, CFMarino, T.A., Walter, R.,Cobb, E., Palasiuk, M., Parsons, T., and Mercer, W.E.: Effects of Norepinephrine on Neonatal Rat Cardiocyte Growth and Differentiation, In Vitro Cell Dev Biol 26, 229, 1990
大鼠大鼠 HeartTrypsin: 0.06%25mM HEPES buffered Locke's solution, CMFTrifaro, J., Tang, R., and Novas, M.: Monolayer Co-Culture of Rat Heart Cells and B綿羊 Adrenal Chromaffin Paraneurons, In Vitro Cell Dev Biol 26, 335, 1990
(also b綿羊)Adrenal chromaffin 
 Paraneurons
大鼠大鼠, adult, femaleMyocytesCollagenase Type 2: 0.05%Joklik's MEMNag, A.C., Lee, M., and Kosiur, J.R.: Adult Cardiac Muscle Cells in Long-Term Serum-Free Culture:Myofibrillar Organization and Expression of Myosin Heavy Chain Isoforms, In Vitro Cell Dev Biol 26, 464, 1990
大鼠大鼠s, AW, late-gestation pregnant femalesVentricularCollagenase Type 2: 0.05 - 0.08%See referenceEngelmann, G., McTiernan, C., Gerrity, R., and Samarel, A.: Technique 2 (6), 279, 1990
Cardiomyocytes
大鼠大鼠,SD, albino, 10-14 weeksMyocytesCollagenase Type 1: 100 u/ml and 150 u/mlKrebs Ringer bicarbonate bufferBerg, I., Guse, A.H., and Gercken, G.: Carbamoylcholine-Induced Accumulation of Inositol Mono-,Bis-,Tris-, And Tetrakisphosphates In Isolated Cardiac Myocytes From Adult Rats, Biochim Biophys Acta 1010, 100, 1989
大鼠大鼠, SD, adult, female, 175 - 225 gMyocytesCollagenase: 0.1%Joklik's mediumBugaisky, L.B. and Zak, R.: Differentiation of Adult Rat Cardiac Myocytes in Cell Culture, Circ Res 64, 493, 1989
大鼠大鼠, SD, male, 250 - 350 gMyocytes, ventricularCollagenase Type 1: 90 and 100 u/mlJoklik's solution with and without calciumDe Young, M., Giannattasio, B., and Scarpa, A.: Isolation of Calcium-Tolerant Atrial And Ventricular Myocytes From Adult Rat Heart,Methods Enzymology Vol. 173,, , 662, 1989
大鼠大鼠, SD, 2-4 day oldCardiomyocytesTrypsin: 0.1%HBSSToraason, M., Luken, M., Breitenstein, M., Krueger, J., and Biagini, R.:Comparative Toxicity of Allylamine and Acrolein in Cultured Myocytes and Fibroblasts from Neonatal Rat Heart, Toxicology 56, 107, 1989
Fibroblasts
大鼠大鼠, SD, maleAortic smooth muscleTrypsin: 0.05%DMEMCornwell, T., and Lincoln, T.: Regulation of Intracellular Ca2+ Levels in Cultured Vascular Smooth Muscle Cells, J Biol Chem 264 (2), 1146, 1989
大鼠大鼠, adult, 150-200 gMyocytes, atriaCollagenase Type 1: 100 u/mlKreb's Ringer bicarbonate - HEPES bufferMcMahon, K.K.: A Study of Adult Rat Atrial Myocyte Attachment to Extricellular Matrix Components and Long Term Culture,Biology of Isolated Adult Cardiac Myocytes,(Clark, Decker, Borg, Eds), Elsevier Science Publishing Co. Inc., 318, 1988
大鼠SD大鼠MyocytesCollagenase Type 2: 0.1%Kreb's Ringer w/ calciumBuxton, I.L.O. and Doggwiler, K.O.: Alpha1-Adrenergic Receptor Signal Transduction in the Adult Rat Cardiac Myocyte,Biology of Isolated Adult Cardiac Myocytes,(Clark, Decker, Borg, eds), , 298, 1988
大鼠SD大鼠, 雄性, 250-350 克Myocytes, heartHyaluronidase: 0.03%Bicarbonate-buffered mediumKim, D. and Smith, T.W.: Temporal Variation in Contractile State And [Ca++] in Isolated Adult Rat And Guinea Pig Cardiac Myocytes,Biology of Isolated Adult Cardiac Myocytes,(Clark, Decker, Borg, eds), Elsevier Science Publishing Co. Inc., 370, 1988
大鼠Wistar大鼠,  2-4 天neonatesMyoblast, cardiacTrypsin: 0.1%Standardized MediumGrynberg, A., Degois, M., Guenot, L., and Athias, P.: Primary Rat Cardiac Cell Culture: Diet of the Mother Rats as a Determinant Parameter of Cardiomyoblast Production from Neonates, Biol Cell 57, 89, 1986
(see reference)
大鼠大鼠, SD, 懷孕的MyocytesTrypsin: 2.4 u/mlDMEMFreerksen, D., Schroedl, N., and Hartzell, C.: Control of Enzyme Activity Levels by Serum and Hydrocortisone in Neonatal Rat Heart Cells Cultured in Serum-Free Medium, J Cell Physiol 120, 126, 1984
大鼠大鼠, SD, 雌性, 12 周MyocytesCollagenase Type 1: 0.06%Krebs Ringer bicarbonate bufferPiper, H.M., Probst, I., Schwartz, P., Hutter, F.J., and Spieckermann, P.G.:Culturing of Calcium Stable Adult Cardiac Myocytes, J Mol Cell Cardiol 14, 397, 1982
大鼠大鼠, 雄性/雌性, 200-250 克MuscleHyaluronidase: 0.1%Krebs Ringer phosphate buffer, CMFNag, A. and Cheng, M.: Adult Mammalian Cardiac Muscle Cells in Culture,Tissue Cell 13, 515, 1981
大鼠大鼠, 雌性, 成年, 200 - 300 克MyocytesCollagenase Type 2: 0.1%Joklik's MEMClaycomb, W.C., and Palazzo, M.C.: Culture of The Terminally Differentiated Adult Cardiac Muscle Cell: A Light and Scanning Electron Microscope Study,Dev Biol 80, 466, 1980
大鼠SD大鼠, 成年, 雄性, 200-250 克MyocytesHyaluronidase: 0.10%Joklik MEM, CFFrangakis, C., Bahl, J., McDaniel, H., and Bressler, R.: Tolerance to Physiological Calcium by Isolated Mycocytes from the Adult Rat Heart; An Improved Cellular Preparation, Life Sci 27, 815, 1980
大鼠SD大鼠, 雌性, 12 周, 250 克MyocytesCollagenase Type 1: 0.20%Kreb's Ringer bicarbonate bufferPowell, T., Terrar, D.A., and Twist, V.W.: Electrical Properties of Individual Cells Isolated From Adult Rat Ventricular Myocardium, J Physiol 302, 131, 1980
Ventricular myocardium
大鼠大鼠, 10 周MyocytesCollagenase Type 1: 0.1%SalineBishop, S., Oparil, S., Reynolds, R., and Drummond, J.: Regional Myocyte Size in Normotensive and Spontaneously Hypertensive Rats, Hypertension 1 (4), 378, 1979
大鼠大鼠, 雄性, 200-300 克MyocytesHyaluronidase: 82 u/mlKreb's Henseleit bufferFarmer, B., Harris, R., Jolly, W., Hathaway, D., Katzberg, A., Watanabe, A., Whitlow, A., and Besch, H.: Isolation and Characterization of Adult Rat Heart Cells, Arch Biochem Biophys 179, 545, 1977
大鼠大鼠,雌性, 白化變種, 200-250克MyocytesHyaluronidase: 0.1%Kreb's Ringers phosphateNag, A., Fischman, D., Aumont, M., and Zak, R.: Studies of Isolated Adult Rat Heart Cells: The Surface Morphology and the Influence of Extracellular Calcium Ion Concentration on Cellular Viability, Tissue Cell 9 (3), 419, 1977
大鼠大鼠, 成年, 雄性, 150-200克MyocytesCollagenase: 0.1%MEM CFGrosso, D., Frangakis, C., Carlson, E., and Bressler, R.: Isolation and Characterization of Myocytes From the Adult Rat Heart, Prep Biochem 7 (5), 383, 1977
Hyaluronidase: 0.1%
大鼠大鼠, 成年的MyocytesCollagenase: 0.1%Perfusing solutionMoustafa, E., Skomedal, T., Osnes, J., and Oye, I.: Cyclic Amp Formation and Morphology of Myocardial Cells Isolated from Adult Heart: Effect of Ca2+ and Mg2+, Biochim Biophys Acta 421, 411, 1976
大鼠 SD大鼠, 白化變種, 雄性, 180-230 克Heart ventricles, beatingCollagenase: 0.05-0.2%Phosphate bufferGlick, M., Burns, A., and Reddy, W.: Dispersion and Isolation of Beating Cells from Adult Rat Heart, Anal Biochem 61, 32, 1974
大鼠大鼠, 希伯來聯合國, 3 & 17 個月, 150-210 克MyocytesTrypsin: 0.05%Versene bufferBierman, E.L., Stein, O., and Stein, Y.: Lipoprotein Uptake and Metabolism by Rat Aortic Smooth Muscle Cells in Tissue Culture, Circ Res 35, 136, 1974
大鼠大鼠, 2-5 天MyocytesTrypsin: 0.01%Saline ASpeicher, D., and McCarl, R.: Pancreatic Enzyme Requirements for the Dissociation of Rat Hearts for Culture, In Vitro 10, 30, 1974
大鼠大鼠, SD, male, 150-200克MyocytesHyaluronidase: 0.05%(see reference)Pretlow II, T., Glick, M., and Reddy, W.: Separation of Beating Cardiac Myocytes from Suspensions of Heart Cells, Am J Pathol 67 (2), 215, 1972
大鼠大鼠, albino, male, 250 克MyocytesHyaluronidase: 0.20%Hank's solution, CFBerry, M., Friend, D., and Scheuer, J.: Morphology and Metabolism of Intact Muscle Cells Isolated from Adult Rat Heart, Circ Res 26, 679, 1970
大鼠大鼠, 成年的, 雄性, 250 克MyocytesTrypsin: 0.1%Saline AVahouny, G.V., Wei, R., Starkweather, R., and Davis, C.: Preparation of Beating Heart Cells From Adult Rats, Science 167, 1616, 1970
大鼠Wistar大鼠,  1-4 天大MyocytesTrypsin: 0.125%Gey's BSSMark, G., and Strasser, F.: Pacemaker Activity and Mitosis in Cultures of Newborn Rat Heart Ventricle Cells, Exp Cell Res 44, 217, 1966
貝類動物太平洋牡蠣HaemocytesTrypsin: L15 mediumLe Duff, R., Lipart, C., and Renault, T.: Primary Culture of Pacific Oyster, Crassostrea gigas, heart cells, J Tiss Cul Meth 16, 67, 1994
貝類動物蚌, 3.0 - 4.5 厘米MyocytesCollagenase Type 1: 2%L15 mediumWen, C., Kou, G., and Chen, S.: C*tion of Cells From the Heart of the Hard Clam, Merretrix lusoria (Roding), J Tiss Cul Meth 15, 123, 1993
Fibroblasts

 

我們公司zui大優勢是強大的采購,

1:基本什么都能進口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進口的,

2:貨品全,現經營過700多個品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進口,特別是冷偏的產品那就更有優勢,

3:提供加急服務,一般1-2周到貨,超過時限加急費全免

4:價格公道,絕大部分價格有優勢,當然不能保證100%產品都是,因為意味著沒有服務.

5:良好的信譽,大部分客戶我們提供貨到付款服務,客戶包括清華,北大 交大 復旦,中山等100多所大學,ROCHE,阿斯利康,國藥 ,fisher等500多家公司

6:我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc, Worthington Biochemical ,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. Dako,Inc, GePromegaridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,Worthington Biochemical , Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,FULLERLABS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。
7:我們還是invitrogen,qiagen,Worthington Biochemical am,sigma;Promega,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發,歡迎合作。

 

国产精品一区二区在线观看 | 久久77 | 亚洲精品影院 | 亚洲一区在线观看视频 | 久久综合一区 | 毛片免费全部无码播放 | 国产美女裸体无遮挡免费视频 | 成人三级视频 | av高清在线| 国产极品美女高潮无套嗷嗷叫酒店 | 无码人妻aⅴ一区二区三区 蜜桃av网 | 午夜激情四射 | 91欧美视频 | 草草在线视频 | 欧美性网| 99成人国产精品视频 | 依人久久 | 少妇精品 | 拔萝卜91 | 国产尤物视频 | 日本免费高清 | 天天操天天看 | 日韩成人无码 | 成人天堂| 玉足女爽爽91 | 男男野外做爰全过程69 | 人妖性做爰aaaa | 在线观看视频91 | 亚洲高清免费 | 亚洲精品自拍偷拍 | 成人视屏在线观看 | 91麻豆产精品久久久久久夏晴子 | 天天射天天干天天操 | 日本特级黄色片 | 日本免费高清视频 | 丁香综合网 | 九九香蕉视频 | 一区二区三区影院 | 精品一区二区三区三区 | 亚洲视频在线免费观看 | 天堂av在线免费观看 | 正在播放adn156松下纱荣子 | 色一情一区二区三区四区 | 国产网址| 日本精品视频 | 久久九| 欧美一区免费 | 男女日批视频 | 香蕉视频色 | 夜夜欢天天干 | 九九自拍 | 亚洲乱码一区二区 | 国产精品久久久久久久久久久久 | 刘亦菲毛片 | 涩涩五月天 | 波多野结衣一区二区三区 | 日韩中文字幕无砖 | 91豆花视频 | 日本久久综合 | 在线黄色网 | 好吊妞这里只有精品 | 动漫艳母在线观看 | 国产亚洲精品久久久久动 | 免费看毛片网站 | 国产精品免费一区二区 | 黄色录像大片 | 欧洲精品码一区二区三区免费看 | 亚洲视频免费观看 | 九九精品国产 | free性满足hd老太婆 | 日韩无遮挡 | 一区二区在线观看视频 | 少妇高潮一区二区三区69 | 伊人激情 | 国产精品视频在线播放 | 亚洲第一av | 九九热这里有精品 | 亚洲欧美日韩综合 | 婷婷天堂 | 自拍超碰 | 91小视频在线观看 | 久草热视频 | av怡红院| 少妇真人直播免费视频 | 91在线观 | 欧美日韩国产高清 | 国产永久免费 | 成人免费视频网站 | 国产人妻黑人一区二区三区 | 日韩欧美一级片 | 尤物网站在线观看 | 91欧美激情一区二区三区成人 | hd极品free性xxx护士 | 操日本美女 | 中文在线观看视频 | 青青视频网 | 欧美一区二区三区四区五区 | 午夜少妇 | 少妇在线观看 | 美女91网站 | 丰满肉肉bbwwbbww| 国产精品成人网站 | 国产精成人品 | 蜜桃做爰免费网站 | 久久精选| 久久久无码人妻精品无码 | 中文字幕在线观看免费高清 | 香蕉视频在线观看免费 | 亚洲色图在线播放 | 超碰在线公开 | 国产美女精品 | 米奇影视777 | 野外(巨肉高h)| 日韩成人高清 | 最好看的mv中文字幕国语电影 | 亚洲第一视频网站 | 亚洲大片在线观看 | 天天色影| 色呦呦网站 | 在线视频中文字幕 | 久久久久黄色 | 麻豆视频观看 | 国产在线一区二区三区 | 欧美日本一区 | 一级黄色录相 | 日本精品视频在线观看 | 日韩三级av | 人妻巨大乳一二三区 | 色哟哟国产| 污网站免费观看 | 自拍偷拍国产 | 国产成人精品免费视频 | 一级a毛片免费观看久久精品 | 黄色av免费看 | 久久免费观看视频 | 天天曰天天干 | 国产精品1区2区3区 白浆在线 | 嫩草影院菊竹影院 | 日本久久久久 | 强公把我次次高潮hd | 黑白配在线观看免费观看 | 免费理论片 | 午夜av在线 | 米奇影院7777免费观看高清完整喜剧电影 | 亚洲性天堂 | 欧美老熟妇又粗又大 | 性一交一乱一区二区洋洋av | 亚洲中文字幕一区二区 | 日韩综合在线 | 天堂网中文在线 | 亚洲av午夜精品一区二区三区 | 亚洲色图在线视频 | 亚州成人 | 中国美女一级片 | 桃色91| 久久综合国产 | 日韩看片| 欧美另类极品videosbest使用方法 | 三级av在线 | 国产丝袜在线 | 成人毛片在线观看 | 欧美老肥妇做.爰bbww视频 | 99热精品在线观看 | 国产精品电影网 | 成年人在线观看免费视频 | 精品人妻午夜一区二区三区四区 | 国产精品99久久久久久久久久久久 | 强伦人妻一区二区三区 | 深夜视频在线观看 | 中文在线字幕观看 | 韩国伦理片在线看 | 国产高清精品软件丝瓜软件 | 天天撸夜夜操 | 欧美午夜影院 | 天天曰天天干 | 国产精品扒开腿做爽爽爽a片唱戏 | 色哟哟国产精品 | 国产一级二级 | 久久久无码人妻精品无码 | 国产美女免费视频 | 欧美混交群体交 | 日本狠狠干 | 天天干夜夜艹 | 永久精品| 中文字幕高清 | 黄视频免费 | 久久精品视频免费 | 动漫玉足吸乳羞免费网站玉足 | 亚洲色图一区二区三区 | 91导航 | 成人在线视频免费观看 | 久久久在线视频 | 神马午夜伦理 | 欧美色图一区二区 | 国产精品久久久国产盗摄 | 欧美久草| 久久99精品久久久久久 | 国产乱仑 | 成年免费视频黄网站在线观看 | 黄色av大片 | 四房婷婷 | 麻豆视频在线播放 | 香蕉视频网址 | 国产激情四射 | 一级视频在线观看 | 天堂成人网 | 亚洲高清免费视频 | 不卡的av网站 | 日本一区二区三区在线观看 | 91片黄在线观看喷潮 | 一区二区中文字幕 | 男女涩涩视频 | 国产女主播在线观看 | 成人动漫一区 | 毛片国产| 美国毛片基地 | 人人爽久久涩噜噜噜网站 | 高清乱码免费看污 | 天天干狠狠干 | 五月丁香啪啪 | 日本中文字幕一区 | 猛男大粗猛爽h男人味 | 国产色网| 日韩av免费在线播放 | 91av视频在线观看 | 精品视频国产 | 淫辱的世界(调教sm)by | 丰满人妻一区二区 | 黑人操日本女人 | 欧美人与性动交α欧美精品 | 丁香综合网| 粗喘呻吟撞击猛烈疯狂 | 麻豆网站入口 | 中文字幕一二区 | 国产精品免费无遮挡无码永久视频 | 成人羞羞国产免费游戏 | www.桃色av嫩草.com | 中字幕一区二区三区乱码 | 国精产品一二三区精华液 | 久久久久久久久久久久久久 | 欧美乱妇狂野欧美在线视频 | 中文字幕av一区二区三区 | 高h校园不许穿内裤h调教 | 精品成人| 在线观看视频一区二区 | 亲子乱对白乱都乱了 | 在线久草 | free女性xx性老大太 | 一级片黄色 | 伊人五月天 | 中文字幕久久久 | 国产六区 | 90岁肥老奶奶毛毛外套 | 日韩无码电影 | 久久精品影视 | 大波大乳videos巨大 | 91免费版网站在线观看 | 欧美欧美欧美 | 久久成人免费视频 | 免费av大片| 少妇高潮灌满白浆毛片免费看 | av一卡二卡 | 法国空姐电影在线观看 | 久草久热 | 天天精品 | 日本午夜精品理论片a级app发布 | 狂野欧美| 玩偶姐姐在线看 | 真实偷拍激情啪啪对白 | 伊人影院久久 | 极品白嫩少妇无套内谢 | 欧美精品久久久久久 | 欧美不卡在线 | 久草福利资源站 | 91在线免费观看网站 | 高清欧美性猛交xxxx黑人猛交 | 日本在线视频观看 | 中文字幕乱妇无码av在线 | 国产精品人人做人人爽人人添 | 久久黄色大片 | 久久久久中文字幕 | 97中文字幕 | 国产免费一区二区三区最新不卡 | 男人和女人免费观看电视连续剧 | 少妇闺蜜换浪荡h肉辣文 | zzjizzji亚洲日本少妇 | 草逼网站| 91在线观看18 | 五月天黄色网 | 国产精品日韩 | 四虎8848 | 日本国产精品 | 久久高清无码视频 | 高清乱码免费看污 | 欧美国产日韩在线 | 男女污污 | 99在线无码精品入口 | 欧美片17c07.com | 私人毛片 | 日韩视频一区 | 久久精品毛片 | 久久婷婷视频 | 欧美视频免费 | 日韩中文视频 | 亚洲免费看片 | 在线中文av | 三级免费网站 | 成人午夜免费电影 | 国产又色又爽又黄刺激在线视频 | 亚洲色吧| 在线免费| 中文字幕乱码人妻二区三区 | 欧美久久久久久久 | 欧美特黄视频 | 欧美混交群体交 | 羞辱狗奴的句子有哪些 | 18深夜在线观看免费视频 | 精品一区二区三区在线观看 | 综合五月 | 草莓污视频在线观看 | 亚洲精品三级 | 久久久91 | 在线播放一区 | 蜜桃91精品入口 | av加勒比 | 911国产精品 | 色狠狠av | 免费成人av | 超碰在线99| 在线观看国产 | 国产麻豆传媒 | 日韩精品电影在线观看 | 色综合88| 国产特级淫片免费看 | 91蝌蚪91九色白浆 | 日本少妇毛茸茸 | 丝袜老师让我了一夜网站 | 天天干天天看 | 亚洲一级大片 | 黄色一及片 | 久久伊人精品 | 99久久久成人国产精品 | 五月婷婷色综合 | 欧美日视频| 日韩毛片网站 | 日韩午夜在线 | 久久精品久久久精品美女 | 自拍偷在线精品自拍偷无码专区 | 国产极品美女高潮无套嗷嗷叫酒店 | 精品人妻一区二区三区四区不卡 | 99精品久久| 日韩成人无码 | 今天成全在线观看免费播放动漫 | www四虎影院| 一区二区三区人妻 | 国产精品视频观看 | av无码一区二区三区 | 亚洲视频一区 | 玖玖视频 | 污污的视频在线观看 | 在线观看的av | 影音先锋制服丝袜 | 国产成人精品一区二区三区 | 日韩欧美精品在线观看 | 国产乱人乱偷精品视频a人人澡 | 饥渴放荡受np公车奶牛 | 亚洲精品综合 | 国产精品大片 | 精产国品一二三产区m553麻豆 | 免费看裸体网站视频 | 91蜜桃| 国产一级二级三级 | 色婷婷综合久久久中文字幕 | 久久精品91| 午夜视频免费观看 | 成人av动漫| 人妻饥渴偷公乱中文字幕 | 国产精品3 | 中文久久乱码一区二区 | 免费av一区 | 国产成人在线视频 | 久艹在线 | 在线免费看黄网站 | 欧美在线观看一区二区 | 影音先锋国产精品 | 亚洲欧美另类图片 | 韩国黄色一级片 | 强videoshd酒醉| 国内精品久久久久久久 | 91视频在线免费看 | 成人精品久久 | 亚洲视频在线观看 | 韩国伦理片在线播放 | 四虎www| 国产va| 精品人伦一区二区三区 | www.一区二区三区 | 操碰视频 | xxx综合网 | 男人吃奶视频 | 男男做爰猛烈啪啪高 | 亚洲精品资源 | 欧美顶级少妇做爰hd | 你懂的在线网站 | 日本大尺度做爰呻吟 | 日本高清一区 | av色综合 | 经典杯子蛋糕日剧在线观看免费 | 99久久久无码国产精品性波多 | 爽躁多水快深点触手 | 熟妇人妻中文字幕无码老熟妇 | 久久影院午夜理论片无码 | 久久视频在线播放 | 青青草国产成人av片免费 | av不卡在线观看 | 可以在线观看的av | 亚洲精品一区二区三区在线观看 | 一区二区三区四区在线视频 | 成人av观看 | 国产免费一区二区三区最新不卡 | 国产传媒在线观看 | av无码av天天av天天爽 | 91视频一区 | 日韩电影院 | 国产美女一区二区 | 欧美一级淫片bbb一84 | 伊人网综合 | 大尺度做爰呻吟62集 | 欧美三级 欧美一级 | 秘密爱大尺度做爰呻吟 | 丁香婷婷激情 | 毛片在线免费 | 国产黄色免费 | 久草免费在线视频 | 欧美一二三 | 日韩在线不卡 | 日本欧美久久久久免费播放网 | 国产中文在线观看 | 尤物视频在线播放 | 插曲在线观看免费播放 | 女子spa高潮呻吟抽搐 | 久久久精品免费视频 | www.伊人 | 大尺度床戏揉捏胸视频 | 中文字字幕在线 | 熟女俱乐部一区二区视频在线 | 欧美老女人性生活 | 欧美一区视频 | 国产丝袜在线 | 日韩有码电影 | 蜜臀视频在线观看 | 午夜高清 | 国产精品传媒 | 欧美日韩大片 | 一级黄色片免费 | 久久毛片视频 | 1000部多毛熟女毛茸茸 | 美女网站免费 | 体内精69xxxxxx| 三级黄色小视频 | 婷婷五月在线视频 | 国产精品亚洲无码 | 国产精品成人在线 | 17c国产精品一区二区 | 日日夜夜天天操 | china国产乱xxxxx绿帽 | 深爱婷婷| 午夜www| 最新av在线播放 | 九色91popny蝌蚪新疆 | 性欧美sm调教 | 日韩一区二区在线播放 | aa片在线观看视频在线播放 | 成人性生活视频 | 免费看黄禁片 | 黄色三级网站 | 国产成人精品一区 | 中文字幕精品久久久久人妻红杏1 | 午夜国产福利 | 极度诱惑香港电影完整 | 天堂网a | 国内自拍偷拍 | 一区二区三区四区精品 | 厨房性猛交hd | 日韩免费在线 | 四虎影库| 在线视频在线观看 | 亚洲精品观看 | 一区二区在线 | 日本免费中文字幕 | 日本精品一区二区三区四区的功能 | 亚洲啪啪 | 欧美va | 淫辱的世界(调教sm)by | 扒开jk护士狂揉免费 | 天堂网a | 久久色av| 麻豆影视| 午夜美女福利视频 | 九九热视频在线观看 | 麻豆免费视频 | 一区二区av| 国产精品毛片久久久久久久 | 粗大的内捧猛烈进出 | 成人黄色免费 | 天天干夜夜拍 | 亚洲视频一区二区 | 好吊操这里只有精品 | 久久av网站| 亚洲免费观看高清完整版在线观看 | 午夜性视频| 亚洲综合在线播放 | 邻居校草天天肉我h1v1 | 国模精品一区二区三区 | 国产精品6| 永久免费av | 国产精品一区二区在线观看 | 精品少妇人妻一区二区黑料社区 | 日韩午夜 | 狼人久久 | 亚洲色欧美| 午夜91| 丝袜老师让我了一夜网站 | 香蕉在线观看 | 日韩电影网站 | 欧美性猛交xxxx乱大交3 | 热久久这里只有精品 | 高h视频在线观看 | 欧美精品综合 | 大尺度在线观看 | 夜间福利视频 | 久久艳片www.17c.com | 午夜激情四射 | 韩日免费视频 | 青青草网址 | 日韩一区在线播放 | 丰满人妻一区二区三区免费 | 日韩精品一二三 | 亚洲一区亚洲二区 | 91九色视频| 久久久网| 亚洲精品乱码久久久久久蜜桃欧美 | 99re视频在线观看 | 午夜视频福利 | 亚洲激情五月 | 亚洲天堂视频在线观看 | 手机免费看av | 美女视频一区二区三区 | 色吊丝中文字幕 | 日本一区二区三区在线观看 | 黑人精品xxx一区一二区 | 一区二区三区成人 | 神马九九 | 天天操,夜夜操 | 久久久97| 日韩爽片| 欧美一区二区精品 | 韩国电影大尺度在线观看 | 日产av在线 | 成人欧美一区二区三区白人 | 在线看国产 | 久久依人 | 九九视频在线 | 色综合久久天天综合网 | 精品无码三级在线观看视频 | 免费看的av | 天天爱天天射 | 七七久久 | 91在线免费视频 | 日本欧美在线 | 欧美日韩黄色 | 国产精品9999 | 国产美女精品视频 | 成年人性生活视频 | 成人精品一区二区 | 黄色一级大片在线免费看国产一 | 久久精品免费观看 | 狠狠干在线视频 | 久久精品电影网 | 一区二区三区四区在线视频 | 成人香蕉视频 | 伊人久久大 | 91日韩| 亚洲色图50p | 五月婷婷在线视频 | 一区二区三区不卡视频 | 激情久久久久 | 青青草在线播放 | 婷婷av在线| 日韩在线影院 | 国产成人精品一区 | 日韩av中文字幕在线 | 成年人视频免费看 | 国产精品色哟哟 | 国产高清在线观看 | 日韩精品视频在线 | 亚洲国产成人av | 亚洲激情网| 日本中文字幕一区 | 日韩欧美视频 | 狠狠干综合 | 国产a精品| 成人免费看片视频 | 亚洲色图在线视频 | 国产1区 | 免费中文字幕日韩欧美 | 亚洲国产精品视频 | 久久久久亚洲精品 | 国产一区二三区 | 久久视频这里只有精品 | 国产精品无 | 欧美卡一卡二 | 亚洲精品在线免费 | 精品人妻一区二区三区四区不卡 | 婷婷免费视频 | 国产精品久免费的黄网站 | 国产黄色大片 | 九九九国产 | 美女视频黄色 | 免费成人毛片 | 尤物在线视频 | 色一情一乱一伦一区二区三区 | 麻豆国产av超爽剧情系列 | 天天做天天干 | 亚洲美女一区 | 一级大毛片 | www奇米影视com | 成人黄色免费网站 | av一区二区三区四区 | 天堂在线免费视频 | 伊人久久在线 | 亚洲三级在线 | 人人插人人插 | 免费处女在线破视频 | 国产一区在线看 | 国产精品视频播放 | 日本中文字幕电影 | 破处视频在线观看 | 国产性猛交 | 狠狠操狠狠爱 | 亚洲h| 91在线视频免费 | 日日夜夜人人 | 日韩av一级 | 亚洲精品久久久 | 欧美日韩视频在线 | 五月开心网 | 亚洲a级片 | 久久久黄色片 | 欧美日韩在线看 | 韩日免费视频 | 亚洲精品美女 | 日本二区 | 日韩不卡在线 | 在线播放91灌醉迷j高跟美女 | 最新日韩av | 女人高潮特级毛片 | 亚洲av成人片无码 | 蜜桃免费视频 | 91在线影院 | www.com国产 | 国模精品一区二区三区 | 日韩大片在线观看 | 97在线视频免费观看 | 天天操综合网 | 美女被草网站 | 在线观看特色大片免费网站 | 三级电影在线看 | 中文字幕91 | 超碰首页 | 人妻少妇精品视频一区二区三区 | 亚洲日本一区二区三区 | 啦啦啦免费高清视频在线观看 | 天天曰天天干 | 日韩三级视频在线观看 | 尤物网站在线观看 | 亚州成人| 日韩视频免费观看高清完整版在线观看 | 日本伊人网 | 国产91免费视频 | 中文字幕无码毛片免费看 | 亚洲国产日韩欧美 | 手机看片久久 | av在线小说 | 久久久久一区二区三区 | 91视频在线看 | 性生活毛片| 中文日韩| 日韩欧美高清dvd碟片 | 日韩av在线免费播放 | 艳妇乳肉豪妇荡乳xxx | 日本加勒比在线 | 韩国三级与黑人 | 亲嘴扒胸摸屁股免费视频日本网站 | 夫妻露脸自拍[30p] | 欧美精品久久久久久久 | 五月天婷婷综合网 | 国产福利视频 | gogo人体做爰大胆视频 | 五月天色综合 | 国产日韩一区二区三免费高清 | 最新毛片网站 | 国产资源在线播放 | 黄色小视频免费观看 | 精品人妻一区二区三区蜜桃 | 国产精品视频一区二区三区, | 精品一区二区三区四区 | 国产裸体美女永久免费无遮挡 | 亚洲AV无码精品国产 | 色婷婷av777| 欧美日韩一 | 日皮视频在线观看 | 亚洲综合另类 | 日韩一区二区三区四区五区 | 四虎在线观看视频 | 成人黄色免费电影 | 女女百合国产免费网站 | 日本色综合 | 四虎av| 97超级碰碰 | 少妇高潮一区二区三区69 | 国产一二三 | 免费看欧美片 | 免费的av网站 | 波多野结衣三区 | 午夜黄色影院 | 国产天天操| 久久偷看各类wc女厕嘘嘘偷窃 | 欧美人与性动交α欧美精品 | 免费黄色网址在线观看 | 中国极品少妇xxxxx | 日韩中文视频 | 91在线观看免费高清完整版在线观看 | 亚洲精品乱码 | 精品国产乱码久久久久久影片 | 成人看片| 午夜秋霞 | 日日夜夜免费视频 | 久草超碰 | 久久只有精品 | 日本在线一区 | 国产一区二区三区在线 | 91成人在线观看喷潮动漫 | 亚洲一区二区三区在线视频 | 四虎影视免费永久大全 | 欧美中文字幕在线 | 国产综合精品 | 国产精品资源 | 精品黄色片 | 亚洲国产精品自拍 | 亚洲一区视频 | 欧美三级电影在线观看 | 中文字幕免费在线看线人动作大片 | 波多野结衣之潜藏淫欲 | 五月丁香 | 国产精品久久久久久久久久久免费看 | 91视频大全 | 日韩精品免费在线观看 | 99热在线观看 | 亚洲熟女一区二区三区 | 黄色日韩| av网站在线免费观看 | 亚洲色欧美| 九九热视频这里只有精品 | 国产激情一区二区三区 | 中文字幕色哟哟 | 亚洲精品专区 | 久久久久久成人 | 国产美女一区二区 | 日韩精品在线免费观看 | 少妇视频| 久草资源在线 | 日日综合 | 天天操网站 | 黄色网址免费 | 体内精视频xxxxx | 国产超碰| 午夜天堂 | 手机在线观看av | 制服.丝袜.亚洲.中文.综合 | 黄色福利 | 91在线无精精品入口 | 中国特级黄色片 | 无码人妻精品一区二区中文 | 超碰999 | 视频一区二区在线观看 | 按摩害羞主妇中文字幕 | 人人干人人看 | 亚洲欧美国产精品 | 久久久精品在线 | 国产午夜一区 | 韩国精品一区 | 97人妻精品一区二区三区免 | 久久久久久一区 | 人妻洗澡被强公日日澡 | a级片免费 | 国产成人精品免费视频 | 亚洲性猛交富婆 | 精品人妻一区二区三区日产 | 日批视频免费 | 天天操夜夜操狠狠操 | 婷婷五月在线视频 | 狠狠的操 | 在线看片a| 国产激情在线视频 | 成人18视频免费69 | 中文在线一区 | 欧美黑人xxx | 亚洲午夜精品久久久久久app | 国产精品亚洲一区二区 | 无码精品在线观看 | 视频区图片区小说区 | 在线成人 | 韩日毛片 | 在线免费观看毛片 | 秋霞午夜影院 | 国产精品久久777777 | 污污小视频 | 一区二区不卡视频 | 国产精品无码一区二区三 | 欧美日韩高清在线 | 操的我好爽 | 大地资源在线观看免费高清版粤语 | 捆绑调教sm束缚网站 | 青青伊人网 | 亚洲一级在线观看 | 91美女精品网站 | 97精品国产 | 久久精品在线视频 | 在线一级片 | 娇妻被老王脔到高潮失禁视频 | 国产精品一区二区入口九绯色 | 先锋av资源网| 日本熟妇毛耸耸xxxxxx | 糖心vlog精品一区二区 | 中文字幕在线观看 | 日韩中文字幕一区二区 | 男人和女人搞鸡 | 亚洲欧美自拍偷拍 | 国产欧美综合一区二区三区 | 天天色影院 | 另类小说五月天 | 免费成人深夜夜国外 | 韩国伦理大片 | 久久只有精品 | 一区免费视频 | 国产不卡在线 | 97人妻精品一区二区三区软件 | 国产精品久久久久毛片大屁完整版 | 韩国三色电费2024免费吗多少钱 | 青青草福利视频 | 免费av一区二区 | 免费在线观看黄色 | 丁香六月婷婷综合 | 性免费视频| 天天综合网站 | 手机看片福利永久 | www.com国产| 色偷偷av | 樱桃av| 亚洲视频一区二区三区 | 国产1级片 | 娇小激情hdxxxx学生 | 樱桃视频入口在线观看网站 | 成人黄色一级片 | 视频区图片区小说区 | 亚洲美女在线观看 | 精品福利在线观看 | 欧美精品久久久久 | 亚洲成人av在线播放 | 婷婷网址 | 亚洲精品电影 | 91免费版网站在线观看 | 日本不卡在线 | 中文字幕乱码人妻二区三区 | 欧美资源 | 91n在线观看 | 中文字幕色哟哟 | 国产人妖视频 | 毛片网站视频 | 美女黄色一级片 | 粗暴浪荡羞辱粗口hh | 婷婷激情四射 | 91在线精品一区二区 | 伊人网av | 国产网站在线 | 久久久久久久久久久久久久久久久久 | 日本黄色小视频 | 成年人视频免费看 | 精品一区二区三区在线观看 | 嫩草视频在线播放 | 91免费视频| 波多野结衣av在线观看 | 色综合色 | 免费处女在线破视频 | 可以免费观看的av | 超碰国产在线 | 天天射天天射 | 黄色小视频在线观看 | 成人综合网站 | 91麻豆产精品久久久久久夏晴子 | 破处视频在线观看 | 久久综合国产 | 国产成人综合视频 | 国产一级二级三级 | 四虎影成人精品a片 | 亲嘴脱内衣内裤 | 四虎4hu永久免费网站影院 | 久草手机在线视频 | 色男人的天堂 | 欧美日韩在线观看视频 | 欧美色图88 | 女女同性被吸乳羞羞 | 日韩一区二区在线播放 | 亚洲第二页 | 2025国产精品 | 免费色片 | 国产精品视频一区二区三区 | 麻豆电影网 | 黄色片视频 | 6996电视影片免费看 | 久久久天堂 | 国产精品免费看 | 99精品久久 | 91成人精品| 蜜臀av一区二区三区 | 欧美国产精品 | 国产女人18毛片18精品 | 人人插人人干 | 成人97| 色综合久久久 | 久久久久久久久久久久久久久久久久久 | 日本一区二区三区在线播放 | 亚洲精品福利视频 | 91在线视频免费观看 | 8x8ⅹ成人永久免费视频 | 黄片一区二区 | 色吧综合| 男女啪啪免费 | 日日摸夜夜爽 | 亚洲国产日韩欧美 | 日本猛少妇色xxxxx猛叫 | 成年人视频免费在线观看 | 插曲在线高清免费观看 | 狠狠撸在线观看 | 99久久久国产精品免费蜜臀 | 亚洲四区 | 亚洲最大网站 | 精品少妇一区二区 | 国产精品久久久爽爽爽麻豆色哟哟 | 狠狠操狠狠操 | 午夜高清 | 青青国产视频 | 精品人妻一区二区三区浪潮在线 | 粉嫩av在线 | 亚洲一级片在线观看 | 在线播放中文字幕 | 成人午夜免费视频 | 国产精品无码一区二区桃花视频 | 中文字幕视频 | 国产黑丝在线 | 久久久久一区二区三区 | 91久久国产综合久久91 | 久久丫精品久久丫 | 国产在线不卡视频 | 女女百合国产免费网站 | 国产嫩草一区二区三区在线观看 | 国产伦精品一区二区三区四区视频 | 黄色在线视频观看 | 男人激烈吮乳吃奶爽文 | www.天天操 | 黄色a级片 | 欧美乱码精品一区二区三区 | av在线免费观看网站 | 国产精品海角社区 | 日韩成人在线视频 | 国产精品久久久久永久免费看 | 精品影院 | av免费看片 | 日本视频在线免费观看 | 成人免费在线电影 | 播放男人添女人下边视频 | av色婷婷 | 麻豆app | 欧美大逼 | 热久久精品| 看毛片网站 | 国产午夜精品一区二区 | 日韩精品免费观看 | 国产精品成人在线 | 四房婷婷 | 国精产品一区一区三区 | 日韩无码专区 | 狠狠干网站 | 国精产品一区二区三区 | 日日操夜夜 | 六月婷婷激情 | 香蕉视频2020 | 夜夜操影院 | 青青草视频在线免费观看 | 男人天堂亚洲 | 日韩精品不卡 | 壮汉被书生c到合不拢腿 | 日本中文在线观看 | 亚洲视频在线观看 | av手机在线播放 | 黄色片网站在线观看 | 中文字幕+乱码+中文字幕一区 | 日韩欧美精品在线 | 午夜视频在线看 | 免费看黄色网址 | 久草视频网 | 国产麻豆| 成人免费看片载 | 亚洲精品一区二区 | 怡红院在线播放 | 国产一区二区三区在线观看 | 久久发布国产伦子伦精品 | 国产做爰xxxⅹ高潮视频12p | 牲欲强的熟妇农村老妇女视频 | 亚洲色图欧美 | 国产精品成人无码专区 | 麻豆免费下载 | 久久国产高清 | 久久久精品一区 | 美女扒开尿口让男人桶 | 黑人玩弄人妻一区二区三区 | 日本一级片 | 国产精品久久久久久久久久免费看 | 中文字幕一区二区三区四区 | 黄色精品视频 | 在线观看黄色网 | 亚洲国产高清国产精品 | 中文字幕亚洲色图 | 精品免费 | av免费在线观看网址 | 妖精视频在线观看 | 狠狠影院 | 午夜激情网 | 国产真人无遮挡作爱免费视频 | 免费看a | 美女露胸软件 | 在线一区二区三区 | 天堂网视频 | 国产丝袜av| 国产免费自拍视频 | 羞羞网站在线观看 | 四季av一区二区凹凸精品 | 国产综合一区二区 | 91视频入口 | 99精品国产一区二区 | 无码人妻一区二区三区线 | 国产资源网 | 视频在线免费观看 | 不卡的av电影 | 精品免费国产一区二区三区四区 | 麻豆视频在线观看免费 | 在线观看亚洲 | 黄色一级片免费看 | 成人免费在线 | 波多野结衣一区二区三区在线观看 | 一级理论片 | 亚洲区av | 欧美乱妇日本无乱码特黄大片 | av片免费| 欧美大肥婆大肥bbbbb | 成人在线免费播放 | 日本一区二区不卡 | 午夜视频免费在线观看 | 亚洲视频精品 | 一区二区三区四区视频 | 亚洲天堂网在线观看 | 爱情岛亚洲首页论坛 | 91桃色视频 | 伊人久久大 | 超碰人人在线 | 欧美国产日韩在线观看 | 色综合99久久久无码国产精品 | 国产精品精品软件视频 | 夜色资源网 | 三级自拍 | 美女黄页网站 | 大乳女喂男人吃奶 | 亚洲精品福利 | 久久精品一区二区三区四区 | 91看黄| 让男按摩师摸好爽视频 | 男生操女生动漫 | 青青草视频网站 | 免费污视频在线观看 | 国产精品视频播放 | 久久成人精品视频 | 九色网址| 青青草手机在线视频 | 国产一级一片免费播放放a 99在线观看视频 | 人人草人人爱 | 激情高潮呻吟抽搐喷水 | 一级黄视频 | 色男人的天堂 | 91网在线 | 色婷五月天 | 老女人毛片 | 亚洲乱码视频 | www.色综合| 污片网站 | 国产午夜精品一区二区三区视频 | 亚洲午夜av| 久久99深爱久久99精品 | 91在线精品一区二区 | 欧美黄色一级大片 | 成人福利在线 | 天天射天天 | 色性av | 米奇影院7777免费观看高清完整喜剧电影 | 91精品国产综合久久久蜜臀九色 | 原神女裸体看个够无遮挡 | 免费看毛片的网站 | 波多野结衣二区 | 国产精品久久久久久亚洲影视 | 国产精品永久免费 | 一本色道久久综合狠狠躁的推荐 | 在线观看日韩 | 日韩精品免费在线观看 | 无码国产精品一区二区高潮 | 亚洲人午夜射精精品日韩 | 日本黄色一级视频 | 好看的中文字幕电影 | 中文字幕在线免费看 | 噜噜噜色| 日本久久精品视频 | 尤物在线视频 | 国产欲妇| 火影黄动漫免费网站 | 成人无码av片在线观看 | 亚洲一卡二卡 | 韩国三级中文字幕hd久久精品 | 一区二区三区四区精品 | 久久久精品一区二区三区 | 玩偶姐姐在线看 | 欧美精品一区二区在线观看 | 精品视频一区二区三区 | 脱女学生小内内摸了高潮 | 精品国产av色一区二区深夜久久 | www.天天干| 久久久久久久久久久久久久 | sm在线观看 | 国产精品7777 | 美女免费网站 | 日韩av在线免费观看 | 蜜臀在线观看 | 黄色片在线播放 | 亚洲无遮挡 | 成年人视频网站 | 91激情 | 在线免费 | 欧美精品久久久久久久多人混战 | 日韩三级在线观看 | 在线伊人网 | 天天射天天干 | 欧美人妻日韩精品 | 国产一二三四区 | 日韩欧美国产综合 | 欧美大片视频 | 91国内精品 | 日韩黄色网 | 亚洲专区在线 | 九九九九精品 | 国产精品久久久午夜夜伦鲁鲁 | av中文天堂| 国产不卡视频 | 看黄色一级片 | 亚洲综合成人网 | 91调教打屁股xxxx网站 | 这里都是精品 | 美日韩在线 | 亚洲综合区 | 伊人久久在线 | 亚洲精品一区二区三区新线路 | 日韩免费在线观看 | 国产综合区 | 爱的人电影全集免费观看 | 天堂资源中文在线 | 伊人五月| 国产成人在线观看免费网站 | 国产精品久久99 | 成年人观看视频 | 国产精品手机在线观看 | 久久毛片 | 国产精品久久久久久久久久久免费看 | 中文国产 | 毛片网站在线观看 | 韩日一区二区 | 91精品国产成人观看 | 这里都是精品 | 亚洲色图欧美激情 | 国产女主播在线观看 | 中文字幕在线观看免费视频 | 水多多| 日韩欧美电影 | 91黄色在线观看 | 亚洲三区在线 | 欧美日韩片 | 亚洲第一福利视频 | 久久综合在线 | 啪啪免费网站 | 黄色免费av | 久久精品美女 | 亚洲免费在线观看视频 | 在线看片网站 | 香蕉一区二区 | 未满十八18禁止免费无码网站 | 欧亚av | 狠狠躁夜夜躁 | 国产一区二区在线播放 | 亚洲久久视频 | 精品欧美日韩 | 免费黄色网址在线观看 | 91爱爱视频| 视频一二三区 | 久久九九精品 | 少妇av在线 | 亚洲激情视频在线观看 | 大尺度做爰床戏呻吟舒畅 | 黑人精品一区二区 | 操操操操操操操 | 操操网站| 亚洲福利片| 操日本女人 | 亚洲免费看片 | 欧美日韩不卡 | 波多野结衣人妻 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | www.桃色av嫩草.com | 久久不卡视频 | 青青草一区 | 91成人短视频 | 自拍偷在线精品自拍偷无码专区 | 成年人在线观看免费视频 | 国产精品96久久久久久 | aaa国产 | 亚洲精品色 | 欧美性生交xxxxx | av免费在线观看网址 | 丁香花高清视频完整电影 | 国产一区二区三区免费 | 亚洲日本中文字幕 | 欧美在线一区二区 | 西西人体大胆4444ww张筱雨 | 午夜拍拍 | 日韩视频一区二区三区 | 国产精品久久久久久久久久免费看 | 美女日批视频 | 亚洲男人天堂 | 福利姬视频在线观看 | 97超级碰碰 | 成人免费在线播放 | 麻豆专区 | 久久av电影 | 毛片哪里看 | 日韩怡红院 | 国产性猛交 | 欧美一级视频在线观看 | 国产六区| 免费看的毛片 | 亚洲色吧 | 青青视频网 | 强辱丰满人妻hd中文字幕 | 国产尤物 | 在线看亚洲 | 91看片视频| 一本色道久久综合亚洲精品小说 | 97精品人妻一区二区三区香蕉 | 久久视频这里只有精品 | 久久综合伊人 | 波多野结衣之潜藏淫欲 | www黄色com| 麻豆国产91在线播放 | 日韩二区三区 | 午夜激情在线观看 | 亚洲成人福利 | 日韩电影免费在线观看中文字幕 | 女厕精品迎bbwfreehd | 国产黄色免费网站 | 亚洲精品91| 午夜aa | 久久综合亚洲色hezyo国产 | 插曲在线高清免费观看 | 成人午夜在线视频 | 亚洲一区二区三区免费视频 | 中文字幕免费高清在线观看 | 久久综合久久鬼 | 北岛玲在线 | 免费看a | 一女二男一黄一片 | 国产一级片视频 | 日本免费黄色片 | 亚洲免费看片 | 男人天堂电影 | 国产人妻人伦精品1国产 | 中文字幕自拍偷拍 | 亚洲精品一区二区三区不卡 | 国产乱码77777777 | 伊人亚洲| 国产伦一区二区三区 | 女上男下动态图 | 国产无遮挡又黄又爽免费网站 | 69免费视频 | 国产综合一区二区 | 久久亚洲一区 | 一区二区三区四区免费视频 | 办公室大战高跟丝袜秘书经理ol | 小萝莉末成年一区二区 | 久久精品小视频 | 好男人在线视频 | 影音先锋国产精品 | 一级在线| 蜜桃av一区二区三区 | 亚洲激情久久 | 亚洲欧美网站 | 少妇搡bbbb搡bbbb | 偷拍第一页 | 国产精品区二区三区日本 | 狠狠人妻久久久久久综合 | 亚洲伦理在线 | 久久免费看 | 可以免费观看的av | 99热这里| 黄色a级大片 | 久久免费看视频 | 久久精品免费观看 | 69免费视频| 黑白配在线观看免费观看 | 风韵丰满熟妇啪啪区老熟熟女 | 美女草逼视频 | 免费av大片| 少妇在线观看 | 欧美日韩黄 | 久久999 | 瑟瑟视频在线观看 | 法国空姐电影在线观看 | 91偷拍视频| 福利在线看 | gogogo日本免费观看电视剧的软件 | 91精品婷婷国产综合久久蝌蚪 | 精品人妻无码一区二区色欲产成人 | 已满十八岁免费观看 | 91小视频在线观看 | 欧洲精品码一区二区三区免费看 | 黄色小说免费观看 | 精品视频在线免费观看 | 欧美一区二区三区不卡 | 在线观看av免费 | 在办公室被c到呻吟的动态图 | 一区二区福利视频 | 五月网站 | 精品久久久久久久久久久久久久 | 中文字幕免费高清在线观看 | 特级西西444www大精品视频 | 欧美大浪妇猛交饥渴大叫 | 1000部啪啪| 在线网址你懂的 | 日本系列第一页 | 国产精品国产 | 欧美浮力影院 | 领导揉我胸亲奶揉下面 | 久草免费在线 | 五月激情小说 | 91精品又粗又猛又爽 | 黑白配在线观看免费观看 | www.夜色| 97人妻人人揉人人躁人人 | 五月天丁香网 | www.一级片 | 欧美第五页 | 亚洲永久 | 国产精品免费无遮挡无码永久视频 | 在线观看污网站 | 波多野结衣一区二区三区 | 中文字幕一级片 | 九色91| 在线观看视频国产 | 国产精品自拍偷拍 | 中文字幕日韩视频 | 欧美性猛交一区二区三区精品 | 狼人综合网 | 美女无遮挡免费视频 | 日本午夜精品理论片a级app发布 | 美女视频黄免费 | 欧美黄网站 | 日韩高清国产一区在线 | 亚洲第一伊人 | 国产女人18毛片水真多1 | 国产成人午夜 | 亚洲欧美在线观看 | 精品国产91乱码一区二区三区 | 日韩视频一区二区 | 欧美精品在线视频 | 亚洲小说区图片区 | 综合色婷婷一区二区亚洲欧美国产 | 日韩在线高清 | 麻豆传媒观看 | 亚洲小视频在线观看 | 艳妇乳肉豪妇荡乳av无码福利 | 日韩精品区| 青青草91| 无码人妻久久一区二区三区蜜桃 | 欧美老肥婆性猛交视频 | 日韩中文字幕一区二区 | 欧美激情免费 | 高跟肉丝丝袜呻吟啪啪网站av | 亚州激情| 99re这里只有| 天堂中文资源在线 | 不卡av在线播放 | 四虎av| 中文字幕精品久久久久人妻红杏ⅰ | 91中文在线 | 艳妇臀荡乳欲伦交换h漫 | 黄色片免费看 | 日韩一区二区三 | 久久香蕉网 | 亲子乱对白乱都乱了 | 亚洲免费高清视频 | 99久久精品国产毛片 | 久久av高潮av无码av喷吹 | 国产伦精品一区二区三区妓女下载 | 成人精品在线视频 | 91九色国产 | 黄色小视频在线免费观看 | 欧美大片免费高清观看 | 岳乳丰满一区二区三区 | 国产aⅴ | 精品人妻一区二区三区四区不卡 | 精品视频在线观看 | 亚洲黄色av | 亚洲欧美日韩一区二区 | 国产精品久久久久久久久借妻 | 大乳女喂男人吃奶视频 | 美女扒开腿免费视频 | 国产一级免费视频 | 欧美伊人网 | 日韩一区二区在线视频 | 日韩欧美电影 | 少妇久久久 | 精品网站999www | 色婷婷亚洲精品 | 亚洲久久久 | 欧美精品久久久久久久多人混战 | 99综合 | 老头老太做爰xxx视频 | 午夜精品少妇 | 风韵丰满熟妇啪啪区老熟熟女 | 在线色网 | 天天摸天天干 | 69视频在线观看 | 成人免费视频网站入口 | 久久99精品久久久久久水蜜桃 | 91小视频 | 宝贝乖~胸罩脱了让我揉你的胸 | 一级特黄色片 | 青青在线视频 | 日韩一区二 | 成人做爰www看视频软件 | 蜜臀av一区 | 91视频在线观看免费 | 又黄又爽视频 | 一级片在线播放 | 91原创视频 | 国产三级在线观看 | 一区二区三区不卡视频 | 免费看91的网站 | 永久在线 | 波多野结衣无限发射 | 国产精品视频一区二区三区 | 在线不欧美 | 午夜电影在线观看 | 成人免费福利视频 | 免费成人深夜 | 蜜臀av一区| 丰满岳乱妇在线观看中字无码 | 久久经典| 欧美成人影片 | 国产欧美一区二区三区在线看蜜臀 | 女人性做爰24姿势视频 | 精品成人在线 | 51调教丨国产调教视频 | 午夜精品久久久久久久99老熟妇 | 日韩av网站在线观看 | 日日干天天操 | 亚洲射图 | 污污网站在线免费观看 | 日韩字幕 | 欧美一区二区三区免费 | 日韩欧美久久 | 日本免费观看视频 | 亚洲精品一区二区三区新线路 | 久久97| 一级在线 | 一区二区三区在线 | 丰满肉肉bbwwbbww | 亚洲黄色影院 | 国产成年妇视频 | 精品无码久久久久久久久 | 亚洲特黄 | 欧美精品一区二区性色a+v | 13日本xxxxxⅹxxx20 | 精品国产乱码 | 精品日韩在线 | 超碰人人插 | 亚洲欧洲自拍偷拍 | 成人黄色电影在线观看 | 狗爬女子的视频 | 欧美激情久久久 | 国产伦精品一区二区三区 | 久久久久久久久久久久久久久 | 亚洲天堂第一页 | 午夜亚洲 | 天天操天天干天天爽 | 制服丝袜av在线 | 色综合av | 五月婷婷综合在线 | 国产乱国产乱老熟 | 在线观看日本 | 国产美女免费视频 | 午夜大片 | 亚洲区在线 | 天码人妻一区二区三区在线看 | av手机天堂| 男女插插视频 | 在线观看污污视频 | 97在线视频免费观看 | 激情综合久久 | 超碰人人澡 | 欧美高清一区 | 丁香伊人 | 欧美日韩高清 | 中文字幕久久精品 | 我的大叔 | 免费网站在线观看人数在哪动漫 | 一区在线视频 | 欧亚乱熟女一区二区在线 | 可以看毛片的网站 | 亚洲色图网址 | 国产91精品在线观看 | 免费看裸体视频 | 久久av高潮av无码av喷吹 | 九色91视频 | 午夜在线观看视频 | 羞辱狗奴的句子有哪些 | 国产91免费| 五月久久| 成人做爰视频www | 久久久天堂国产精品女人 | 日韩精品一区二区三区在线观看 | 天天爽天天操 | 日韩免费在线视频 | 黄色美女视频网站 | 国产一区二区三区精品视频 | 麻豆传谋在线观看免费mv | 香蕉久久a毛片 | 91麻豆传媒 | 美女娇喘 | 另类专区亚洲 | 久久综合久久鬼 | 青青国产| 在线免费毛片 | 欧美成人精品 | 丰满少妇一区二区三区专区 | 高清乱码免费网 | 久久国产精品无码一级毛片 | 天天色播 | 中文字幕在线电影 | 新红楼梦2005锦江版高清在线观看 | 青青草视频在线免费观看 | 美女黄页网站 | 色婷婷激情 | 一区二区三区免费观看 | 国产成人片 | 国内精品久久久久 | 爱的人电影全集免费观看 | 国产精品久久久久久中文字 | 免费的视频app网站入口 | 成人亚洲电影 | 五月激情综合 | 日韩欧美久久 | 精品香蕉视频 | 自拍偷拍第二页 | www.成人网| 欧美精品乱码99久久蜜桃 | 欧美在线综合 | 成人免费视频网站入口 | 大尺度做爰呻吟舌吻网站 | 在线国产视频 | 最新中文字幕av | 狠狠干网| 羞羞色院91蜜桃 | 国产真实乱人偷精品人妻 | 黄色综合网站 | 日韩av在线直播 | 中文字幕一区二区三区人妻电影 | 精品人妻一区二区三区四区不卡 | 天天爽夜夜操 | 三级自拍 | 日本理论片午伦夜理片在线观看 | 久久久久久久极品内射 | 日韩黄色在线 | 成人女同在线观看 | 日韩精品中文字幕在线观看 | 国产精品电影网 | 麻豆网址| 欧美日韩中文字幕 | 精品99视频| 免费色网站 | 亚洲视频一区二区三区 | 欧美性猛片aaaaaaa做受 | 夜夜躁狠狠躁日日躁av | 欧美电影一区二区 | 五月天激情综合网 | 久久久精品久久 | 高清一区二区三区 | 少妇色 | 久草免费在线视频 | 免费不卡av| 最好看的2019中文大全在线观看 | 日本黄色中文字幕 | 日韩国产在线观看 | 亚洲精品国产精品乱码不卡√香蕉 | 手机看片福利永久 | 日韩精品久久久久久久 | 国产做受高潮动漫 | 这里只有精品在线观看 | 一区在线视频 | www日韩| 国产成人99久久亚洲综合精品 | 色九九九 | 久久久www成人免费精品 | 五月婷综合 | 亚洲精品免费在线 | 国产后入清纯学生妹 | 国产福利91精品一区二区三区 | av色综合 | 国产三区视频 | 精品一二三 | 视频在线观看免费 | 91在线免费观看网站 | 91爱爱视频 | 国产精品国产成人国产三级 | 7788色淫网站小说 | 国产黄色在线播放 | 成人精品视频在线观看 | 仙踪林av| 中国黄色大片 | 91喷水| 国产在线麻豆精品观看 | 日韩福利在线观看 | 伊人精品视频 | 中文字幕在线观看免费 | 麻豆乱码国产一区二区三区 | 免费视频成人 | 日韩特级片 | 欧美精品999| 在线免费观看毛片 | 久久国产精品波多野结衣av | 亚洲熟妇av乱码在线观看 | 黄色一及片 | 午夜资源| 美女被到爽高潮视频 | 在线观看免费高清视频 | 91成人看片 | 国产精选av | 黄色av网| 国产欧美日本 | 日韩天堂 | 五月婷丁香 | 色婷婷国产精品久久包臀 | 水果派av解说 | av一区二区三区四区 | 乳女教师の诱惑julia | 风流少妇一区二区三区91 | 男人天堂色 | 日韩精品一二三区 | 欧美巨鞭大战丰满少妇 | 中文字幕一区二区三区乱码 | 男人添女人下部高潮全视频 | 亚洲精品第一 | 九九热在线观看 | 日本人和亚洲人zjzjhd | 日韩黄色一级片 | 久久亚洲视频 | 打白嫩光屁屁女网站 | 青春草视频 | 国产乱人乱偷精品视频a人人澡 | 自拍偷在线精品自拍偷无码专区 | 天天久久 | 无码人妻aⅴ一区二区三区玉蒲团 | 欧美一区免费 | 大乳女喂男人吃奶视频 | av成人在线观看 | 国产成人午夜 | 日韩av高清在线观看 | 一级性视频 | 色图偷拍 | 一区二区不卡视频 | 最好看的2019免费观看 | 校草调教喷水沦为肉奴高h视频 | 精品久久久久久久久久久久 | 久久久久久久久久久久久久久久久久久 | 国产草草 | 毛片资源| 五月天精品 | 青娱乐国产 | 中文字幕免费在线看线人动作大片 | 国产一级生活片 | 99人妻碰碰碰久久久久禁片 | 91涩漫成人官网入口 | 久久久久久99 | 99福利视频 | 日韩在线视频免费观看 | 亚洲另类av | 精品视频一区二区三区 | 91精品一区 | 羞辱狗奴的句子有哪些 | 在线观看亚洲 | 操操操日日日 | 欧美激情在线播放 | 精品亚洲一区二区 | 在线视频观看 | 欧美成人乱码一区二区三区 | 青青在线视频 | 中文字幕久久精品 | 特黄aaaaaaa片免费视频 | 黄色片在哪里看 | 欧美综合久久 | 国产视频第一页 | 美女撒尿无遮挡网站 | 青青国产 | 国产黄色精品视频 | 人妻体内射精一区二区 | 97精品 | 欧美黑人做爰爽爽爽 | 夜夜操天天干 | 精品日韩 | 榴莲视频黄色 | 国产精品久久久国产盗摄 | 亚洲精品三级 | 欧美肥老妇 | 一区二区三区免费观看 | 日本私人影院 | 九九视频这里只有精品 | 欧美久久久久 | www.一级片 | 国产首页| 国产一区二区电影 | 人人爽久久涩噜噜噜网站 | 成人在线视频播放 | 欧美一区二区三区 | 四虎影视大全 | 欧美第三页 | 一区二区国产视频 | 日韩成人小视频 | av影院在线观看 | 精品国产区一区二 | av手机天堂网 | 麻豆视频在线观看免费 | 蜜臀久久| 9i看片成人免费看片 | 草草福利影院 | 91久久 | 午夜激情网| 国产精品一区在线观看 | 日韩黄网 | 白丝校花扒腿让我c | 国产精品一区二区不卡 | 男人日女人逼 | 一级片毛片 | 国产无人区码熟妇毛片多 | 波多野结衣电影在线播放 | aaa亚洲| 色悠悠久久 | 国产午夜精品一区二区三区四区 | 男女做爰猛烈高潮描写 | 亚洲免费视频网站 | 91视频播放 | 91高跟黑色丝袜呻吟在线观看 | a在线视频 | 99精品视频在线观看 | 黑白配在线观看免费观看 | 精品视频 | 久久久久久久极品内射 | 亚洲免费视频网站 | 69精品无码成人久久久久久 | 日韩国产精品视频 | 久精品视频 | 自拍偷拍亚洲欧美 | 夜夜操影院 | a级片免费看 | 五月天黄色网 | 欧美日韩性 | 日韩人妻一区二区三区 | www午夜 | 麻豆精品国产传媒 | 国产青青 | 国产精品一区二区三 | 91蜜桃婷婷狠狠久久综合9色 | 中文字字幕一区二区三区四区五区 | 最好看2019中文在线播放电影 | 国产激情综合五月久久 | 视色影院 | 美日韩av| 制服丝袜在线播放 | 亚洲国产一区二区三区 | 国模一区二区 | 亚洲激情av | 99国产精品久久久久久久成人 | 国产高清av | 国产精品激情 | av在线视| 久久99精品国产.久久久久 | 麻豆91视频| 国产精品九九九 | 日本精品久久 | 久久久久久久久久久久久久久久久久久久 | 一本在线 | 精品免费 | 亚洲香蕉 | 日本女人毛茸茸 | 九九精品视频在线观看 | 亚洲精品97久久中文字幕无码 | 欧美在线视频免费 | 成人在线观看网站 | 久热免费视频 | 久久精品黄色 | 亚洲精品免费看 | 全部孕妇毛片丰满孕妇孕交 | 中文字幕在线一区 | 中文字幕一区二区人妻电影 | 欧美日韩国产一区 | 麻豆传媒观看 | 国产亚洲精品久久久久动 | 国产麻豆 | 国产日韩视频 | 欧美精品999| 精品久久久久久久久久久久久久久 | 国产欧美综合一区二区三区 | 中文字幕自拍偷拍 | 在线观看视频一区 | 日本理论片 | 国产区在线观看 | 日日夜夜免费精品视频 | 亚洲人网站 | 最新毛片网站 | 奇米影视大全 | 森泽佳奈在线播放 | 奇米成人 | 国模私拍视频 | 亚洲日本一区二区 | 天天操夜夜骑 | 丰满大爆乳波霸奶 | 911视频高清完整版在线观看 | 色欲av伊人久久大香线蕉影院 | 国产精品亚洲一区二区 | 成年人免费看 | 久久久精品一区二区三区 | 活大器粗np高h一女多夫 | 成人毛片18女人毛片免费 | 欧美一区二区免费 | 久久最新 | 欧美成人精品一区二区男人看 | 美女一区 | www黄色片 | 亚洲黄色av| av在线资源 | 国产做爰xxxⅹ久久久精华液 | 色姑娘综合网 | 免费成人深夜夜国外 | 国产精品嫩草影院桃色 | 手机看片国产 | 大尺度做爰呻吟舌吻网站 | 丰满人妻一区二区三区免费视频 | 麻豆app | 免费国产| 日韩欧美久久 | 日本三级日本三级日本三级极 | 日韩国产精品视频 | www精品 | 噜噜噜色| 青草视频在线 | 特级丰满少妇一级aaaa爱毛片 | 日韩不卡 | 亚洲爆乳无码一区二区三区 | 国产精品偷乱一区二区三区 | 欧美怡红院 | 成人网站免费观看 | 国产成人午夜 | 国产成人在线观看免费网站 | 岳乳丰满一区二区三区 | 强侵犯の奶水授乳羞羞漫虐 | 国产精品一级二级三级 | 日日日干干干 | 九九视频在线 | 久久久久久亚洲av无码专区 | 国产一级特黄aaa大片 | 国产又色又爽又黄又免费 | 911香蕉视频 | 狠狠撸在线观看 | 四虎av在线| 干爹你真棒插曲免费 | 日韩欧美精品在线 | 香蕉污视频 | 日韩成人高清 | 激情久久久 | 女虐女白袜调教丨ⅴk | 青青伊人网 | 成人mv | 天天综合网站 | aaa在线| 欧美一页| 中文字幕免费在线 | 尤物在线观看 | 人人综合 | 亚洲精品不卡 | 怒海潜沙秦岭神树 | 奇米成人 | 日韩国产一区二区三区 | 特黄老太婆aa毛毛片 | 午夜免费福利视频 | 91视频入口 | 水姐影院 | 手机av网 | 国产麻豆一区二区三区 | 日本美女性爱视频 | 涩涩久久| 九九九色| 黑人一区二区 | 午夜视频一区二区 | 免费在线观看毛片 | 国产日本在线 | 成年人视频在线免费观看 | 超碰久草 | 1024在线视频 | 欧美日韩综合在线 | 波多野结衣在线 | 国产精品欧美日韩 | 性の欲びの女javhd | 久草福利 | 91麻豆视频 | 亚洲观看黄色网 | 久久久麻豆| 欧美在线一区二区三区 | 亚洲激情一区 | 男生插女生视频 | h片在线观看 | 国产麻豆视频 | 欧美极品喷水 | 女生喷水视频 | 人人干视频 | 99re | 亚洲综合在线视频 | 亚洲欧洲在线观看 | 国产精品99| 亚洲成人免费观看 | 麻豆传谋在线观看免费mv | 在线播放日韩 | 欧美熟妇精品黑人巨大一二三区 | 欧美一区二区三区在线视频 | 欧美在线网站 | 精品网站999www | 日本一区二区在线视频 |