solvobiotech OATP1A2說明書

SB-OATP1A2-PREDICELL™ UT-96w Kit

Category
PREDICELl  Kits

Transporter
OATP1A2

Uptake Transporter Assay

攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白分析

轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的細(xì)胞攝取機(jī)制在許多與結(jié)構(gòu)無關(guān)的藥物的藥代動力學(xué)中起著關(guān)鍵作用。這些蛋白質(zhì)存在于所有重要的藥理屏障組織中，能夠使中低滲透性藥物跨質(zhì)膜轉(zhuǎn)運(yùn)，從而確定吸收，分布和消除途徑。與攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白相互作用的測試有可能預(yù)測藥物在系統(tǒng)水平運(yùn)動中的主要因素。評估受試物對攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的抑制潛力可能表明藥物與藥物之間的相互作用，例如在環(huán)孢菌素A和他汀類藥物^1、2的情況下。

如今，聯(lián)合療法已廣泛用于許多不同治療類別的藥物。他汀類藥物通常與其他藥物（例如免疫抑制劑，抗糖尿病藥或貝特類藥物）合用，以在診所治療患者。這增加了在這些藥物顯著的藥物相互作用的風(fēng)險^{3，4，5，6}。

因此，重要的是通過使用適當(dāng)的體外工具來指導(dǎo)藥物開發(fā)中的量身定制的臨床相互作用研究，來解決與各個患者群體相關(guān)的可能的藥物-藥物相互作用風(fēng)險。除了建立完善的細(xì)胞色素P450相互作用研究以外，藥物相互作用還可能發(fā)生在藥物主動轉(zhuǎn)運(yùn)的水平上，涉及OATP和OAT載體和/或不同的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。在涉及他汀類藥物的藥物相互作用中，除細(xì)胞色素P450酶外，還發(fā)現(xiàn)OATP溶質(zhì)載體家族的成員也參與其中。

表達(dá)人類OATP載體的重組細(xì)胞系通常用于研究這些載體^7的體外藥物相互作用的潛能。間接和直接攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白測定是用表達(dá)所選人或大鼠攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子進(jìn)行的。細(xì)胞粘附在處理過的表面上，從而可以輕松分離運(yùn)輸?shù)暮瓦^量的低滲透性底物分子。

抑制劑評估研究

在這些測定中，測量了測試物品（TA）對攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的標(biāo)記探針底物的轉(zhuǎn)運(yùn)的抑制潛力。用冷TA進(jìn)行測定。探針底物通過選定的人類攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中。值以相對標(biāo)度表示，其中100％定義為在溶劑存在下且沒有TA（無抑制）的轉(zhuǎn)運(yùn)，0％定義為在沒有轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性下檢測到的轉(zhuǎn)運(yùn)。IC 50定義為抑制報道分子底物轉(zhuǎn)運(yùn)50％所需的濃度。該測定法提供了有關(guān)所選攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白與所研究的TA之間可能影響探針底物轉(zhuǎn)運(yùn)的任何相互作用（底物或抑制劑）的信息。

底物評估研究

底物評估通常作為抑制研究的后續(xù)行動，但可以在單獨(dú)的模塊中進(jìn)行。每個模塊都是根據(jù)前一個模塊的結(jié)果計劃和啟動的。

第1單元–檢測主動傳輸?shù)脑圏c(diǎn)實驗：

預(yù)期的結(jié)果是確定是否可以測量攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的冷（或同位素標(biāo)記）化合物進(jìn)入細(xì)胞的攝取。

模塊2 –運(yùn)輸?shù)脑敿?xì)動力學(xué)特性：

模塊2的目的是確定KM和Vmax值。將使用已知的底物和抑制劑（在抑制研究中用作探針底物和參考抑制劑）研究運(yùn)輸抑制作用。將在優(yōu)化的TA濃度和7種濃度的抑制劑/底物分子下研究已知抑制劑/底物對TA轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。

模塊3 –潛在的藥物相互作用的特征：

選擇的已知或未知的藥物的IC50取決于測試物品的運(yùn)輸。了解有關(guān)我們的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白測定服務(wù)的更多信息。SOLVO Biotechnology已開發(fā)并獲得了廣泛的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，用于研究測試物品與攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的相互作用。我們的承運(yùn)人產(chǎn)品組合正在不斷擴(kuò)大。SOLVO還可以定制開發(fā)其他轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系。也可提供攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白過表達(dá)細(xì)胞系的許可。

參考文獻(xiàn)：

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